24小时热门版块排行榜    

查看: 1823  |  回复: 12

maoxuequn

新虫 (小有名气)

[求助] PCR跑胶图 已有3人参与

最近我的胶总是变成这样,各位,我也不知道怎么破,因为都是一样的加样和程序,但是,最近一直出现这个,不晓得什么原因。胶啊,还有各种都没有改变。

PCR跑胶图
IMG_7434.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

湘西小伙儿

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maoxuequn: 金币+5, 有帮助, marker木有了 2015-10-18 20:45:26
怎么都没maker啊,做个对照,看看是电泳系统的问题还是你的DNA降解了或者是在提取DNA的过程中把基因组的DNA给弄断了
8楼2015-10-14 19:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

反应链

新虫 (正式写手)

当我遇到这种情况的时候,首先把模板和引物换了,用质粒和相应的引物扩增。因为质粒是最容易扩增的,可以快速确定PCR仪、扩增体系、电泳条件等有没有问题。一般都没有问题的,确定后再使用新稀释的DNA和引物,原来是降解了。
2楼2015-10-13 19:46:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maoxuequn

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2015-10-13 19:46:27
当我遇到这种情况的时候,首先把模板和引物换了,用质粒和相应的引物扩增。因为质粒是最容易扩增的,可以快速确定PCR仪、扩增体系、电泳条件等有没有问题。一般都没有问题的,确定后再使用新稀释的DNA和引物,原来是 ...

这是植物提取的DNA,降解的可能真的比较大,差不多也有近2年的时间了。就是也算是突然出现吧,因为之前一次的几次都没有这种情况出现,
3楼2015-10-13 20:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kodey

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maoxuequn: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-10-18 20:43:55
模板少加些,提高一下PCR退火温度试试。
4楼2015-10-14 10:18:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我心中有猛虎

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maoxuequn: 金币+10, 有帮助, 40° 2015-10-18 20:44:21
maoxuequn: 金币+20, 有帮助 2015-10-18 20:46:38
退火温度多少啊,提高退火温度4一下,引物特异性不强?
5楼2015-10-14 12:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flhua

木虫 (正式写手)

bachelordom

建议提高退火温度试试,或者换其他聚合酶试试

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

只要有梦想,坚持就一定能实现
6楼2015-10-14 12:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

董小露

金虫 (小有名气)

小牛

楼主你解决这个问题了么,我做的也是这样的
7楼2015-10-14 17:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2008315

新虫 (初入文坛)

感觉不是模板降解的问题,酶和pcr仪出问题的可能性更大

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2015-10-14 20:13:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maoxuequn

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kodey at 2015-10-14 10:18:36
模板少加些,提高一下PCR退火温度试试。

恩恩,我导师说是退火温度的原因,我还在继续探索
10楼2015-10-18 20:43:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 maoxuequn 的主题更新
信息提示
请填处理意见