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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 综合其他 » 豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了
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ImEven

新虫 (初入文坛)

[求助] 豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了 已有2人参与

豚鼠肝细胞眼科剪剪碎后用胰酶消化30分钟再用300目筛网过滤不了，消化后有大量黏稠液，应该是这些堵住了筛孔，求大神指点这些粘稠液是什么？怎么才能让细胞顺利筛过筛网？消化后再把粘稠液去掉过筛虽然可以顺利过滤了，但是这样一来单个细胞也被去除了吧，这样过滤后在显微镜下也看不到多少细胞了…求大神指教！！

豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了


豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了-1


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1楼 2015-09-27 10:59:07
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ImEven

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 14:17:49
dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶，在消化液中加入5倍体积的完全培养基（其中含有10%FBS），就不会很粘了

好的谢谢，我明天去试试看

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6楼2015-09-27 15:53:55
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najura

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基，轻轻混匀摇晃，中和胰酶，然后在过筛，就不会很粘稠了，必要时可以加DNAse I

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2楼2015-09-27 11:20:14
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ImEven

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 11:20:14
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基，轻轻混匀摇晃，中和胰酶，然后在过筛，就不会很粘稠了，必要时可以加DNAse I

DT是什么…

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3楼2015-09-27 11:47:14
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ImEven

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 11:20:14
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基，轻轻混匀摇晃，中和胰酶，然后在过筛，就不会很粘稠了，必要时可以加DNAse I

是胰酶的5倍体积的10%FBS吗？我按文献上的是一比一比例加的小牛血清就还是很黏稠
豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了-2



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4楼2015-09-27 11:49:40
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