24小时热门版块排行榜    

查看: 1375  |  回复: 8

ImEven

新虫 (初入文坛)

[求助] 豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了 已有2人参与

豚鼠肝细胞眼科剪剪碎后用胰酶消化30分钟再用300目筛网过滤不了,消化后有大量黏稠液,应该是这些堵住了筛孔,求大神指点这些粘稠液是什么?怎么才能让细胞顺利筛过筛网?消化后再把粘稠液去掉过筛虽然可以顺利过滤了,但是这样一来单个细胞也被去除了吧,这样过滤后在显微镜下也看不到多少细胞了…求大神指教!!

豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了


豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

najura

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基,轻轻混匀摇晃,中和胰酶,然后在过筛,就不会很粘稠了,必要时可以加DNAse I

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-09-27 11:20:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ImEven

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 11:20:14
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基,轻轻混匀摇晃,中和胰酶,然后在过筛,就不会很粘稠了,必要时可以加DNAse I

DT是什么…

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-09-27 11:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ImEven

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 11:20:14
消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基,轻轻混匀摇晃,中和胰酶,然后在过筛,就不会很粘稠了,必要时可以加DNAse I

是胰酶的5倍体积的10%FBS吗?我按文献上的是一比一比例加的小牛血清就还是很黏稠
豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了-2



发自小木虫IOS客户端
4楼2015-09-27 11:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

najura

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
ImEven: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 谢谢你!今天试了你的方法过滤效果非常好! 2015-09-28 16:55:19
dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶,在消化液中加入5倍体积的完全培养基(其中含有10%FBS),就不会很粘了

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-09-27 14:17:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ImEven

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by najura at 2015-09-27 14:17:49
dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶,在消化液中加入5倍体积的完全培养基(其中含有10%FBS),就不会很粘了

好的谢谢,我明天去试试看

发自小木虫IOS客户端
6楼2015-09-27 15:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

najura

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ImEven at 2015-09-27 15:53:55
好的谢谢,我明天去试试看
...

祝成功

发自小木虫IOS客户端
7楼2015-09-27 23:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liang_423

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用注射器加过滤头的那种。要加压才行!!
8楼2015-09-28 16:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

消化时间太长了,细胞裂解释放出了大量DNA,所以粘稠,消化的时候要看着点组织块的状态,也可以试一下胶原酶,初次做实验的话要做预实验,不同的组织消化时间是不一样的,注意镜下观察
9楼2015-09-30 17:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ImEven 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +6 tcxiaoxx 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:23 by edmund7
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见