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豚鼠肝细胞剪碎用胰酶消化后用300目筛网过滤不了 已有2人参与
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豚鼠肝细胞眼科剪剪碎后用胰酶消化30分钟再用300目筛网过滤不了，消化后有大量黏稠液，应该是这些堵住了筛孔，求大神指点这些粘稠液是什么？怎么才能让细胞顺利筛过筛网？消化后再把粘稠液去掉过筛虽然可以顺利过滤了，但是这样一来单个细胞也被去除了吧，这样过滤后在显微镜下也看不到多少细胞了…求大神指教！！  发自小木虫IOS客户端 |
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已经有1人回复
4楼2015-09-27 11:49:40
najura
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1884.5
- 红花: 1
- 帖子: 89
- 在线: 13.2小时
- 虫号: 1140855
- 注册: 2010-11-07
- 专业: 发育生物学与生殖生物学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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消化后加入DT的5倍体积的含10%FBS的完全培养基，轻轻混匀摇晃，中和胰酶，然后在过筛，就不会很粘稠了，必要时可以加DNAse I 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-09-27 11:20:14
3楼2015-09-27 11:47:14
najura
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ImEven: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 谢谢你！今天试了你的方法过滤效果非常好！ 2015-09-28 16:55:19
ImEven: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 谢谢你！今天试了你的方法过滤效果非常好！ 2015-09-28 16:55:19
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dt是含有0.02%edta的0.25%胰酶，在消化液中加入5倍体积的完全培养基（其中含有10%FBS），就不会很粘了 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2015-09-27 14:17:49