应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 跪求铁皮石斛RNA提取方法
421/5返回列表12345下一页
查看: 2278  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

astwenth

新虫 (初入文坛)

[求助] 跪求铁皮石斛RNA提取方法 已有6人参与

急急急， 各位大神，小弟最近尝试用过各种方法提过铁皮石斛的RNA，用过TIANGEN公司的多糖多酚试剂盒，天恩泽公司的植物RNAout试剂盒，并且送到3家生物公司去提取过，结果提取效果都不好，有的很模糊，有的直接没有。有提过这种药用植物或者同学提过这种药物的大神吗？有的话麻烦指导一下小弟，不胜感激。上传的有两张最近公司提取得到的RNA图片。跪求铁皮石斛RNA提取方法
M4KM6}_Y1MH0J$APB]{~YSE.png


跪求铁皮石斛RNA提取方法-1
[){V[V$47`M478E%7XPODOU.png
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : RNA.Tif
    • 2015-09-21 17:56:41, 1.25 M

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-09-21 18:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by naringenin at 2015-09-21 19:29:44
提过藏红花，紫杉，雪莲，肉苁蓉，烟草，拟南芥，兰花，月季。
没提过铁皮石斛，不过这植物看上去还好，不应该是很难提取的样子啊，多尝试一些方法吧。
第一张图还可以啊，用来反转录做qrt-pcr是够了。
要是做转 ...

二楼的貌似没提过RNA，第一张图都那个样子还说提的好，居心何在？

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-09-21 21:02:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-21 21:02:52
二楼的貌似没提过RNA，第一张图都那个样子还说提的好，居心何在？
...

5年前做的变性RNA电泳，呵呵
跪求铁皮石斛RNA提取方法-2
IMG_2284.JPG
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-09-21 21:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by naringenin at 2015-09-21 21:14:21
我这位没提过RNA的给您看看
我提取的紫杉细胞的RNA的凝胶电泳和agilent2100的检测的区别，对了，这个电泳的浓度是稀释10倍的。
您提取的比这个好就拿出来秀秀。

2.png

1.png
...

这个是转录组测序用的，完整度要求达到8.5以上。
一般反转录成cDNA，克隆一两个基因，做几个基因的rt-pcr，楼主那张图的RNA是可以凑合用的。
但是用于race和测序，有降解，完整度堪忧，需要慎重。
从楼主第一张图看，方法还凑合可以，控制好RNA酶活性，提高手艺可以解决完整度。
不知道楼主用了多少材料提取的，浓度偏低。提高浓度从三个方面解决：裂解效率，多糖多酚去除，取嫩的组织。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2015-09-21 22:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

naringenin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
astwenth: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-23 14:42:58
提过藏红花，紫杉，雪莲，肉苁蓉，烟草，拟南芥，兰花，月季。
没提过铁皮石斛，不过这植物看上去还好，不应该是很难提取的样子啊，多尝试一些方法吧。
第一张图还可以啊，用来反转录做qrt-pcr是够了。
要是做转录组测序，或者做race的话，好像是有些降解了。
看完整性的话，条件好的话，用agilent2100检测一下就可以了，一般的琼脂糖电泳只能大概的看，不过我不太看好你的第一张图的完整性。
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-21 19:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
astwenth: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-23 14:43:43
我提过一些比较难的，愿试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-21 21:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-21 21:02:52
二楼的貌似没提过RNA，第一张图都那个样子还说提的好，居心何在？
...

就您提取过RNA，呵呵！您还提取过很难的，拿出来看看啊！
就您看过好的RNA是什么样子啊！

凝胶电泳一般跑出来会差点意思，就那个电泳图来说，一般实验够用了，我也明确说了不能用于race和测序，您的眼睛长得真好。

牛人秀一下啊！
赞一下 回复此楼
5楼2015-09-21 21:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-21 21:03:50
我提过一些比较难的，愿试试

我这位没提过RNA的给您看看
我提取的紫杉细胞的RNA的凝胶电泳和agilent2100的检测的区别，对了，这个电泳的浓度是稀释10倍的。
您提取的比这个好就拿出来秀秀。
跪求铁皮石斛RNA提取方法-3
2.png


跪求铁皮石斛RNA提取方法-4
1.png
赞一下 回复此楼
6楼2015-09-21 21:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
astwenth: 金币+1 2015-09-23 14:44:05
我们提的非常好，天天做反转录，荧光定量pcr

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-09-21 21:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
样本是新鲜的还是保存的？是新鲜的话那可能是操作上的的问题，如果是保存的样本再提取RNA，可能是因为保存不当引起的。从-70的冰箱再拿出来如果不立刻进行提取的话RNA会降解的。
赞一下 回复此楼
。
8楼2015-09-21 21:45:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-21 21:02:52
二楼的貌似没提过RNA，第一张图都那个样子还说提的好，居心何在？
...

07年年底做microarray所用的RNA检测，这个是拟南芥的，好提取，质量可好了，呵呵！
跪求铁皮石斛RNA提取方法-5
3.png
赞一下 回复此楼
10楼2015-09-21 22:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 astwenth 的主题更新
421/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 7/350 2026-05-24 10:20 by 光伏爱好者
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 7/350 2026-05-23 16:57 by articlefan
[基金申请] 揭秘青基评审内幕：几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭