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请高手指点为什么我这个基因转不进去
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大家好，我实验上出了个问题困扰很久，请高手出来指点一下。我试验上要转一个扩增出来的大小8000左右bp的片段到promega 的pGEM-T Easy载体上，扩增出来很清晰，切胶回收也很清晰，酶连用的是promega的连接酶，连接过夜，做转化蓝白斑也长出很多白斑，可是筛选出的质粒大小都不对，切出来的片段才1000bp左右，做了很久都是这样，我都重复n次了，一直不明白原来的片段连不上也算了，连上的1000bp的片段是哪里来的？ 我相同的实验步骤连接2000bp的都成功了，就是这个大点儿的片段一直连不上去，有时候明明看很多白斑可筛选出来都不对，真是郁闷，请高手指点一下，不胜感激 |
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