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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 求助：DNA浓度太低，电泳无条带，无法做酶切
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助：DNA浓度太低，电泳无条带，无法做酶切 已有6人参与

真菌材料，提了一周的DNA,总是浓度太低，可以满足一般的测序。跑电泳没有条带，无法做酶切，求同行指点！怎么办？

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1楼 2015-09-18 23:44:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

果小胖子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提高DNA的含量是最为必要的一点，你可能需要再摸索一下提取DNA的方法了，优化一下每一个试剂的量的多少
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自在昆明
9楼2015-09-21 16:12:07
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普通回帖

xlij1981

新虫 (正式写手)
先试试

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2楼2015-09-19 00:05:26
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tjuhaoran

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
自在昆明: 金币+6, ★★★很有帮助, 感谢回帖帮忙！ 2015-09-19 11:00:54
乙醇抽提 浓缩DNA

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3楼2015-09-19 02:41:05
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)
可以从一开始就把浓度提高吧，买个试剂盒，天根的就足够了，然后加大提取样本量。每次1.5ml离心管只加研磨样品到0.5那，提出来非常浓。或者就是楼上说的，每次多提几管，然后浓缩到一起。

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自在昆明
4楼2015-09-19 07:23:56
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自在昆明

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by ggyy0911 at 2015-09-19 07:23:56
可以从一开始就把浓度提高吧，买个试剂盒，天根的就足够了，然后加大提取样本量。每次1.5ml离心管只加研磨样品到0.5那，提出来非常浓。或者就是楼上说的，每次多提几管，然后浓缩到一起。
...

恩，谢谢，浓缩的话，我是放在37度恒温箱里面蒸发一晚上，不知道是否合适？
浓度提上来了，但是仍没有条带。
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5楼2015-09-19 10:58:54
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自在昆明

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tjuhaoran at 2015-09-19 02:41:05
乙醇抽提 浓缩DNA

谢谢，用过，但是效果也是不理想
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6楼2015-09-19 11:00:11
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小情绪你不懂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 自在昆明 at 2015-09-19 10:58:54
恩，谢谢，浓缩的话，我是放在37度恒温箱里面蒸发一晚上，不知道是否合适？
浓度提上来了，但是仍没有条带。...

可以试试改变一下MIX的浓度/我之前也是木有条带、、就是因为mix的浓度不够
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7楼2015-09-19 20:49:56
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自在昆明

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小情绪你不懂 at 2015-09-19 20:49:56
可以试试改变一下MIX的浓度/我之前也是木有条带、、就是因为mix的浓度不够...

mix是什么？

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8楼2015-09-19 21:07:27
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coofir

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以多提几次，然后把这几次提取的样品都用同用一个pcr吸附柱回收。
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10楼2015-09-21 20:03:23
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