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自在昆明

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助:DNA浓度太低,电泳无条带,无法做酶切 已有6人参与

真菌材料,提了一周的DNA,总是浓度太低,可以满足一般的测序。跑电泳没有条带,无法做酶切,求同行指点!怎么办?

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果小胖子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提高DNA的含量是最为必要的一点,你可能需要再摸索一下提取DNA的方法了,优化一下每一个试剂的量的多少

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2015-09-21 16:12:07
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普通回帖

xlij1981

新虫 (正式写手)

2楼2015-09-19 00:05:26
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tjuhaoran

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
自在昆明: 金币+6, ★★★很有帮助, 感谢回帖帮忙! 2015-09-19 11:00:54
乙醇抽提 浓缩DNA

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3楼2015-09-19 02:41:05
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

可以从一开始就把浓度提高吧,买个试剂盒,天根的就足够了,然后加大提取样本量。每次1.5ml离心管只加研磨样品到0.5那,提出来非常浓。或者就是楼上说的,每次多提几管,然后浓缩到一起。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2015-09-19 07:23:56
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by ggyy0911 at 2015-09-19 07:23:56
可以从一开始就把浓度提高吧,买个试剂盒,天根的就足够了,然后加大提取样本量。每次1.5ml离心管只加研磨样品到0.5那,提出来非常浓。或者就是楼上说的,每次多提几管,然后浓缩到一起。
...

恩,谢谢,浓缩的话,我是放在37度恒温箱里面蒸发一晚上,不知道是否合适?
浓度提上来了,但是仍没有条带。
5楼2015-09-19 10:58:54
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tjuhaoran at 2015-09-19 02:41:05
乙醇抽提 浓缩DNA

谢谢,用过,但是效果也是不理想
6楼2015-09-19 11:00:11
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小情绪你不懂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 自在昆明 at 2015-09-19 10:58:54
恩,谢谢,浓缩的话,我是放在37度恒温箱里面蒸发一晚上,不知道是否合适?
浓度提上来了,但是仍没有条带。...

可以试试改变一下MIX的浓度/我之前也是木有条带、、就是因为mix的浓度不够
7楼2015-09-19 20:49:56
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小情绪你不懂 at 2015-09-19 20:49:56
可以试试改变一下MIX的浓度/我之前也是木有条带、、就是因为mix的浓度不够...

mix是什么?

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8楼2015-09-19 21:07:27
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coofir

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以多提几次,然后把这几次提取的样品都用同用一个pcr吸附柱回收。
10楼2015-09-21 20:03:23
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