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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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自在昆明: 金币+5, 有帮助 2015-09-26 17:18:47
不知道你用什么方法提,如果浓度不高就别用试剂盒了,试试搅丝法,浓度可能高些。另外,常温效果不好就4度提取试试看。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2015-09-21 20:44:54
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 果小胖子 at 2015-09-21 16:12:07
提高DNA的含量是最为必要的一点,你可能需要再摸索一下提取DNA的方法了,优化一下每一个试剂的量的多少

谢谢

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12楼2015-09-26 17:18:11
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by zhaodahe at 2015-09-21 20:44:54
不知道你用什么方法提,如果浓度不高就别用试剂盒了,试试搅丝法,浓度可能高些。另外,常温效果不好就4度提取试试看。

谢谢,已经解决

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13楼2015-09-26 17:18:32
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大brain

银虫 (小有名气)

怎么解决的啊,让我们也参考一下,怎么提真菌的dna

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态度很重要
14楼2015-09-26 23:04:11
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果小胖子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

多次提取DNA之后,富集到一起后再进行后续实验。DNA含量低是不是和你提取的真菌所处的生长时期有关,最好在进行DNA提取之前也进行一下OD值得检测,当然是真菌大多数处于对数生长期的时候是最好的。祝好
15楼2015-09-27 17:49:12
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MMCCBB

新虫 (著名写手)

可以换营养丰富的培养基过夜培养提。

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16楼2015-09-27 22:53:37
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谢婷婷

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 自在昆明 at 2015-09-19 21:07:27
mix是什么?
...

传统的pcr体系中有dna模版,上下游引物,酶,dntps以及水,现在有很多的厂家出的mix是酶和dntps的混合物

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17楼2015-09-28 00:31:07
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

真菌DNA提取的关键在于菌体要裂解完全,所以裂解菌体是需要优化的关键环节,通常情况下我们会用液氮充分研磨真菌细胞样品再上相关的试剂盒,如果效果还不理想,建议购买进口DNA提取试剂盒,按试剂盒使用要求提取DNA。另外,楼主说能满足测序,电泳不出条带。电泳不出条带的DNA也敢拿去测序?DNA测序仪品控都不做?测序结果能信?
18楼2015-09-28 09:33:55
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自在昆明

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by dorecnu at 2015-09-28 09:33:55
真菌DNA提取的关键在于菌体要裂解完全,所以裂解菌体是需要优化的关键环节,通常情况下我们会用液氮充分研磨真菌细胞样品再上相关的试剂盒,如果效果还不理想,建议购买进口DNA提取试剂盒,按试剂盒使用要求提取DNA ...

谢谢您的回复!明天再从头做一次!

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19楼2015-11-20 23:49:18
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shx0743

新虫 (正式写手)

你可以先把之前提的重新沉淀,少溶点水,上样看看你DNA的质量,好方便你改进提取中的问题!

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20楼2015-11-22 07:37:46
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