应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR的目的片段是2200bp左右，但是扩增不出来
71/1返回列表
查看: 2285  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuxinyueer

木虫 (正式写手)

[交流] PCR的目的片段是2200bp左右，但是扩增不出来 已有6人参与

PCR的目的片段是2200bp左右，但是扩增不出来，出来的条带在600bp左右，我用的酶是transstart KD plus dna polymerase，模板是逆转录后的cDNA
回复此楼

» 猜你喜欢
欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
1楼 2015-09-13 15:28:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

naringenin

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
光pcr出不来的可能性就有很多，何况是反转录pcr，你提供的信息不足以判断任何事情。
anyway，根据我多年反转录pcr的经验，
大部分反转录pcr做不出来的原因在于RNA质量差。
当然还有很多其他可能的原因。
只能祝你实验顺利了。
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2015-09-13 16:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

neon_alone

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果模板是CDNA的话，模板质量好坏很重要，还有就是引物设计很重要。PCR扩不出来原因太多了，只能逐渐摸索，你说的太过广泛，不好分析。你首先要确定你的CDNA 260/280在1.8-2才比较好，而且比较新不会降解的问题。而且比如50ul体系中，模板就100-300ng比较好，多了也不行。引物特别特别重要，退火我一般从53-58设置梯度除非比较特殊的情况。另外我推荐一个全式金的酶，fastPFUfly，加入硫酸镁的，你可以试试。适用于复杂的模板
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-13 16:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liutong1026

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
实验每一步都需要验证的，不要等最后了出不了结果在去找愿因。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-14 13:23:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
高品质2×逆转录MIX，操作方便简单，RT反应只需加入模板和水，免费试用申请进行中，有意请PM哦······
赞一下 回复此楼
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
5楼2016-04-25 17:16:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun-donghong

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
bio-rad数字PCR仪走起

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-11-05 16:36:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅海狂蛟

新虫 (初入文坛)
用pfu酶跑一下试试
赞一下 回复此楼
7楼2017-11-05 17:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuxinyueer 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 3/150 2026-10-25 14:23 by XiYP04It3Evb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-25 14:20 by XiYP04It3Evb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-25 14:07 by XiYP04It3Evb
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-25 13:54 by XiYP04It3Evb
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 DI1qFHFK0KbE 2026-10-24 4/200 2026-10-25 13:18 by XiYP04It3Evb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 4/200 2026-10-25 13:15 by XiYP04It3Evb
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 9/450 2026-10-25 13:02 by XiYP04It3Evb
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-25 12:59 by XiYP04It3Evb
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 10/500 2026-10-25 12:51 by XiYP04It3Evb
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 11/550 2026-10-25 12:45 by XiYP04It3Evb
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 4/200 2026-10-25 12:36 by XiYP04It3Evb
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 4/200 2026-10-25 12:32 by XiYP04It3Evb
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 GVGRDgNfv7P4 2026-10-23 4/200 2026-10-25 12:10 by XiYP04It3Evb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 4/200 2026-10-25 01:22 by XcOYG53d3x4p
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-25 00:15 by XcOYG53d3x4p
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 11/550 2026-10-24 23:35 by XcOYG53d3x4p
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 3/150 2026-10-24 15:41 by Equinoxhua
[文学芳草园] 说走就走，走到哪便是哪 +5 Amei_123 2026-10-18 10/500 2026-10-23 22:38 by Amei_123
[文学芳草园] 亲密关系 +7 宋昙 2026-10-21 13/650 2026-10-23 17:07 by 小牧11
[考博] 郑州大学申博 +5 stars~ 2026-10-19 8/400 2026-10-22 15:06 by stars~
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭