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冰扣儿

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗? 已有9人参与

各位大神好!marker从上到下是15000,10000,7500,5000,3000,1500,1000,500.这个电泳图是7584bp的质粒跑的,双酶切的片段50bp,所有整齐像一字的条带都是双酶切的,两条特别的条带是原质粒,原质粒跑成这样能割胶回收吗?

质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗?
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰扣儿 at 2015-09-10 11:34:31
这个质粒也做过两个酶切位点的分别单酶切 正常 转染过293T 有绿色荧光 重新转化的感受态 涂板 也长出单菌落了 就是这个原质粒跑的电泳不知道是不正常还是没跑开...

你一样的个东西整这么多孔干啥?省着点琼脂做果冻吃不好么?这样得切下来多少?后面胶回收一路也是麻烦,一遍遍过柱子不累啊?

切吧,酶切产物大小符合预期

干这个事情,上个没有切的质粒,只是让你看看是不是切了之后跟原始质粒不一样了。质粒在agaraose gel上怎么跑,跑多快,陈词滥调的东西,管他干啥,跟你怎么抽的还有关系呢。你现在区别明显,目的达到,ok
7楼2015-09-10 13:16:47
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-10 23:04:40
有点奇怪啊,原质粒由于超螺旋构象,应该跑得比酶切的快才对,怎么会在上面呢
话说原质粒为什么要切胶回收呢,重新转化提质粒不就好了?
2楼2015-09-10 07:27:51
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仇峰12306

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这也不对啊,切开的应该跑的慢啊。
3楼2015-09-10 09:16:50
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冰扣儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-09-10 07:27:51
有点奇怪啊,原质粒由于超螺旋构象,应该跑得比酶切的快才对,怎么会在上面呢
话说原质粒为什么要切胶回收呢,重新转化提质粒不就好了?

我要割胶回收连接目的片段
优秀,是一种习惯!
4楼2015-09-10 11:20:43
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