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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗？
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冰扣儿

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗？ 已有9人参与

各位大神好！marker从上到下是15000,10000,7500,5000,3000,1500,1000,500.这个电泳图是7584bp的质粒跑的，双酶切的片段50bp，所有整齐像一字的条带都是双酶切的，两条特别的条带是原质粒，原质粒跑成这样能割胶回收吗？

质粒跑出这样的电泳图可以割胶回收吗？
QQ图片  09 09.jpg
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优秀，是一种习惯！
1楼 2015-09-10 00:15:16
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰扣儿 at 2015-09-10 11:34:31
这个质粒也做过两个酶切位点的分别单酶切 正常 转染过293T 有绿色荧光 重新转化的感受态 涂板 也长出单菌落了 就是这个原质粒跑的电泳不知道是不正常还是没跑开...

你一样的个东西整这么多孔干啥？省着点琼脂做果冻吃不好么？这样得切下来多少？后面胶回收一路也是麻烦，一遍遍过柱子不累啊？

切吧，酶切产物大小符合预期

干这个事情，上个没有切的质粒，只是让你看看是不是切了之后跟原始质粒不一样了。质粒在agaraose gel上怎么跑，跑多快，陈词滥调的东西，管他干啥，跟你怎么抽的还有关系呢。你现在区别明显，目的达到，ok
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7楼2015-09-10 13:16:47
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evangelina

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-10 23:04:40
有点奇怪啊，原质粒由于超螺旋构象，应该跑得比酶切的快才对，怎么会在上面呢
话说原质粒为什么要切胶回收呢，重新转化提质粒不就好了？
赞一下(4人) 回复此楼
2楼2015-09-10 07:27:51
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仇峰12306

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这也不对啊，切开的应该跑的慢啊。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-09-10 09:16:50
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冰扣儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by evangelina at 2015-09-10 07:27:51
有点奇怪啊，原质粒由于超螺旋构象，应该跑得比酶切的快才对，怎么会在上面呢
话说原质粒为什么要切胶回收呢，重新转化提质粒不就好了？

我要割胶回收连接目的片段
赞一下 回复此楼
优秀，是一种习惯！
4楼2015-09-10 11:20:43
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查看全部 27 个回答
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