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Jsunshine

新虫 (小有名气)

[求助] 跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图(巨赏)已有2人参与

跪求腺病毒载体pAdEasy-1的电泳图(巨赏):求大家帮我鉴定一下这个是不是pAdEasy-1。如果有小伙伴跟我一样需要用到AdEasy-1质粒的,可以帮我分析一下这是什么情况么?你们实验室保存的是不是也是这样的呢?

第一幅电泳图,泳道12是我们实验室保存的AdEasy-1质粒,因为浓度比较大,所以看不清是否有两条带。但是,我将这个质粒分别转化进入DH5a和BJ5183以后,提取出来的质粒为1-11泳道,明显看到是两条带。我现在有些困惑,因为我没办法确定这个质粒是不是有问题,所以没办法进行下一步,我一直在反思是我操作出了问题么,还是质粒本身就是两条带呢?求解释!

跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图(巨赏)
222.jpg
第二幅图电泳图,是我稀释了以后跑的图,中间出了一个圈,我还是没办法确认是不是两条带。
跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图(巨赏)-1
3333.jpg
第三幅图,是第二幅图接着又跑了帮个小时以后的图,还是看不清。
跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图(巨赏)-2
1113.jpg
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-02 22:54:28

girl,质粒有多种构象,走在胶上有多条带,你不知道??
你若担心,至少也该酶切一下,线性化之后,再判断大小。
2楼2014-07-02 20:48:31
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Jsunshine

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-07-02 20:48:31

girl,质粒有多种构象,走在胶上有多条带,你不知道??
你若担心,至少也该酶切一下,线性化之后,再判断大小。

我现在手上的质粒已经不够酶切了,我做了转化,但是提取出来的都是两条带,我酶切以后,没有东西了。
3楼2014-07-02 21:12:27
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牧笛萧萧

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般我们是用Pac 1酶切鉴定,如果有2条带才算是正常的,两条带相差很明显的,直接跑质粒没有多大意义的,因为这个质粒本身就很大,很难判断是不是这个质粒,还有就是抽提质粒的时候也要小心,这么大的质粒得率不是很高。
努力腾飞
4楼2014-08-13 08:19:10
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wcelg

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 牧笛萧萧 at 2014-08-13 08:19:10
一般我们是用Pac 1酶切鉴定,如果有2条带才算是正常的,两条带相差很明显的,直接跑质粒没有多大意义的,因为这个质粒本身就很大,很难判断是不是这个质粒,还有就是抽提质粒的时候也要小心,这么大的质粒得率不是很 ...

虫友您好,冒昧的打扰一下,我现在在做腺病毒包装,请问您有转染pAdEasy-1的BJ5183菌株吗,或者两个分开的也行,不知能否提供我一些,非常感谢。我的邮箱是wcelg@hotmail.com.
新人啊
5楼2015-10-21 00:25:02
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