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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图（巨赏）
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Jsunshine

新虫 (小有名气)

[求助] 跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图（巨赏） 已有2人参与

跪求腺病毒载体pAdEasy-1的电泳图（巨赏）：求大家帮我鉴定一下这个是不是pAdEasy-1。如果有小伙伴跟我一样需要用到AdEasy-1质粒的，可以帮我分析一下这是什么情况么？你们实验室保存的是不是也是这样的呢？

第一幅电泳图，泳道12是我们实验室保存的AdEasy-1质粒，因为浓度比较大，所以看不清是否有两条带。但是，我将这个质粒分别转化进入DH5a和BJ5183以后，提取出来的质粒为1-11泳道，明显看到是两条带。我现在有些困惑，因为我没办法确定这个质粒是不是有问题，所以没办法进行下一步，我一直在反思是我操作出了问题么，还是质粒本身就是两条带呢？求解释！

跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图（巨赏）
222.jpg
第二幅图电泳图，是我稀释了以后跑的图，中间出了一个圈，我还是没办法确认是不是两条带。
跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图（巨赏）-1
3333.jpg
第三幅图，是第二幅图接着又跑了帮个小时以后的图，还是看不清。
跪求腺病毒pAdEasy-1的电泳图（巨赏）-2
1113.jpg
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1楼 2014-07-02 20:14:17
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-02 22:54:28

girl，质粒有多种构象，走在胶上有多条带，你不知道？？
你若担心，至少也该酶切一下，线性化之后，再判断大小。
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2楼2014-07-02 20:48:31
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Jsunshine

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-07-02 20:48:31

girl，质粒有多种构象，走在胶上有多条带，你不知道？？
你若担心，至少也该酶切一下，线性化之后，再判断大小。

我现在手上的质粒已经不够酶切了，我做了转化，但是提取出来的都是两条带，我酶切以后，没有东西了。
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3楼2014-07-02 21:12:27
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牧笛萧萧

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般我们是用Pac 1酶切鉴定，如果有2条带才算是正常的，两条带相差很明显的，直接跑质粒没有多大意义的，因为这个质粒本身就很大，很难判断是不是这个质粒，还有就是抽提质粒的时候也要小心，这么大的质粒得率不是很高。
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努力腾飞
4楼2014-08-13 08:19:10
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wcelg

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 牧笛萧萧 at 2014-08-13 08:19:10
一般我们是用Pac 1酶切鉴定，如果有2条带才算是正常的，两条带相差很明显的，直接跑质粒没有多大意义的，因为这个质粒本身就很大，很难判断是不是这个质粒，还有就是抽提质粒的时候也要小心，这么大的质粒得率不是很 ...

虫友您好，冒昧的打扰一下，我现在在做腺病毒包装，请问您有转染pAdEasy-1的BJ5183菌株吗，或者两个分开的也行，不知能否提供我一些，非常感谢。我的邮箱是wcelg@hotmail.com.
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新人啊
5楼2015-10-21 00:25:02
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