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求助荧光定量PCR阴性对照出阳性结果，并且很有梯度 已有1人参与
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求助各位前辈： 做荧光定量很久终于出结果发现好像是污染啦。 5个基因做标准曲线，刚开始怎么扩都没有扩增曲线，后来终于有扩增曲线发现阴性对照ct值在35，内参16s ct值大概是26。关键是标准曲线5个浓度还是由梯度的。 换过地方加样，换过mix，换过引物和水。阴性对照依然出结果。 求前辈指条明路。 |
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2楼2015-09-07 11:18:38
3楼2015-09-07 11:20:16
4楼2015-09-09 17:01:56
5楼2015-09-10 07:16:18
helios_hj
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 18 (小学生)
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- 性别: GG
- 专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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质控可以做个阴性多照和空白对照，阴性对照和标本一起进入核酸提取程序，空白对照是除了核酸模板不加，其他反应体系都有，这样两个对照可以监控提取核酸和配置反应体系两个环节 发自小木虫Android客户端 |
6楼2015-09-10 07:25:21
7楼2015-09-11 16:06:01