应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 对奇异变形杆菌中基因进行敲除
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 966  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

周志惠

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 对奇异变形杆菌中基因进行敲除 已有2人参与

对奇异变形杆菌中基因进行敲除，最后对克隆进行PCR验证，无论是菌落还是菌液，还是煮沸后的上清，都不能P出条带？求助原因或方法
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-09-02 14:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
4楼: Originally posted by 园园许 at 2015-09-05 16:34:14
是不是引物出问题了，或者是温度不合适？你做的是菌落PCR，所以所扩增的片段不会太长，你试试用质量较高的模板扩增一下。一般菌落PCR扩增片段超过3k就不容易扩增了。你有没有做重复，PCR仪有时候也存在不稳定性，还 ...

之前用提的基因组是能P出来的，用菌液或者菌落做过好几次，都没有P出来
赞一下 回复此楼
5楼2015-09-06 11:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

xrxleisure

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对最后够好的重组质粒P不出条带吗？
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-02 15:22:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by xrxleisure at 2015-09-02 15:22:56
对最后够好的重组质粒P不出条带吗？

不是，是对将重组质粒电转进去，然后去抗性平板上的菌P不出，并且以一开始的野生型菌为模板，也P不出
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-02 16:00:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

园园许

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by 周志惠 at 2015-09-02 16:00:16
不是，是对将重组质粒电转进去，然后去抗性平板上的菌P不出，并且以一开始的野生型菌为模板，也P不出...

是不是引物出问题了，或者是温度不合适？你做的是菌落PCR，所以所扩增的片段不会太长，你试试用质量较高的模板扩增一下。一般菌落PCR扩增片段超过3k就不容易扩增了。你有没有做重复，PCR仪有时候也存在不稳定性，还有确定PCR体系配制的完整性。
赞一下 回复此楼
高兴是一天，苦恼也是一天，何以？
4楼2015-09-05 16:34:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 295分求调剂 +14 W55j 2026-03-30 17/850 2026-04-01 22:43 by peike
[考研] 理学07化学 303求调剂 +12 睿08 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:36 by Dyhoer
[考研] 266求调剂 +7 阳阳哇塞 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:27 by barlinike
[考研] 284求调剂 +12 小熊～～ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 英一数一408，总分284，二战真诚求调剂 +10 12.27 2026-03-30 12/600 2026-04-01 15:38 by 西松屋地铁
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +11 倾____萧 2026-03-27 12/600 2026-04-01 15:27 by oooqiao
[考研] 求调剂 +5 零八# 2026-03-27 5/250 2026-04-01 14:40 by yulian1987
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +17 minht 2026-03-26 17/850 2026-04-01 09:11 by xiayizhi
[考研] 322求调剂 +4 熹僖XX 2026-03-31 4/200 2026-04-01 08:21 by JourneyLucky
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +11 dongfang59 2026-03-27 11/550 2026-03-31 16:51 by Wang200018
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 342求调剂 +4 加油a李zs 2026-03-26 4/200 2026-03-30 16:39 by 晶体之美
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭