应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 对奇异变形杆菌中基因进行敲除
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 972  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 对奇异变形杆菌中基因进行敲除 已有2人参与

对奇异变形杆菌中基因进行敲除，最后对克隆进行PCR验证，无论是菌落还是菌液，还是煮沸后的上清，都不能P出条带？求助原因或方法
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-09-02 14:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xrxleisure at 2015-09-02 15:22:56
对最后够好的重组质粒P不出条带吗？

不是，是对将重组质粒电转进去，然后去抗性平板上的菌P不出，并且以一开始的野生型菌为模板，也P不出
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-02 16:00:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对最后够好的重组质粒P不出条带吗？
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-02 15:22:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

园园许

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 周志惠 at 2015-09-02 16:00:16
不是，是对将重组质粒电转进去，然后去抗性平板上的菌P不出，并且以一开始的野生型菌为模板，也P不出...

是不是引物出问题了，或者是温度不合适？你做的是菌落PCR，所以所扩增的片段不会太长，你试试用质量较高的模板扩增一下。一般菌落PCR扩增片段超过3k就不容易扩增了。你有没有做重复，PCR仪有时候也存在不稳定性，还有确定PCR体系配制的完整性。
赞一下 回复此楼
高兴是一天，苦恼也是一天，何以？
4楼2015-09-05 16:34:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 园园许 at 2015-09-05 16:34:14
是不是引物出问题了，或者是温度不合适？你做的是菌落PCR，所以所扩增的片段不会太长，你试试用质量较高的模板扩增一下。一般菌落PCR扩增片段超过3k就不容易扩增了。你有没有做重复，PCR仪有时候也存在不稳定性，还 ...

之前用提的基因组是能P出来的，用菌液或者菌落做过好几次，都没有P出来
赞一下 回复此楼
5楼2015-09-06 11:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-04-01 3/150 2026-04-01 22:36 by barlinike
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +5 what张 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:35 by guanxin1001
[考研] 275求调剂 +12 waltzh 2026-04-01 12/600 2026-04-01 21:44 by chyhaha
[考研] 379求调剂 +3 ?苦瓜不苦 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:09 by 暮云清寒
[考研] 324求调剂 +10 hanamiko 2026-03-26 12/600 2026-04-01 16:59 by oooqiao
[考研] 350求调剂 +7 阿佳～ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
[考研] 321求调剂 +8 y-yh 2026-04-01 8/400 2026-04-01 14:44 by 星空星月
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突， 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 一志愿：西北大学，英一数一408-284分求调剂 +7 12.27 2026-03-27 7/350 2026-03-31 21:59 by lbsjt
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +10 XX小邓 2026-03-29 10/500 2026-03-31 16:46 by 不吃魚的貓
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭