应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » PAMAM类似的denderimer载吸附基因后转染问题
101/1返回列表
查看: 1595  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩

[求助] PAMAM类似的denderimer载吸附基因后转染问题 已有2人参与

本人合成一种新的材料，大体和PAMAM类似。做过了琼脂糖实验，可以吸附基因；也做了肝素提取实验和RNase抗降解实验，结果都可以。
转染进入细胞失败。
重复n多次了，对照品lipo可以转进去，但自己的材料携带基因后转不进细胞（A549，293T都试过）.
求高手指点！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
踏踏实实地走好自己的路
1楼 2015-09-01 15:22:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
自己先顶一下。
求制剂做基因的同行们指导指导。
不胜感激！
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
2楼2015-09-01 15:24:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 好专业，不明觉厉！ 2015-09-04 21:44:15
704361326: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-06 20:38:19
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
3楼2015-09-02 12:32:32
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybrjack

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 不懂，顶一下！ 2015-09-04 21:44:31
704361326: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-06 20:42:16
电位，要20mV，结合DNA粒径200nm一下，是不是材料太毒了？还是N\P太低了？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-02 23:55:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

这样啊。
你以前做过PEI吗？它的转染效率怎么样？
我不求多，50-70%都行。可我现在做的10%都不到啊
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
5楼2015-09-06 20:40:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

你有好的意见或建议吗？
我现在材料没法改，只能接着做的。。。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
6楼2015-09-06 20:41:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
4楼: Originally posted by ybrjack at 2015-09-02 23:55:43
电位，要20mV，结合DNA粒径200nm一下，是不是材料太毒了？还是N\P太低了？

谢谢您的回答！
材料毒性不大，远小于lipo，N/P比筛了很多，有转进去的，转染效率低，最高的不超过10%。
关于电位和粒径，我想问您一下：
如果要测电位和粒径，DNA浓度达到多少合适？我的基因是买的，不敢多用啊。。。。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
7楼2015-09-06 20:45:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

PEI转染效率本身就低吗？PEI是两亲性的吗？
一般转染效率能达到多少？
我的是PAMAM类似物。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
8楼2015-09-06 20:53:01
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybrjack

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 704361326 at 2015-09-06 20:45:35
谢谢您的回答！
材料毒性不大，远小于lipo，N/P比筛了很多，有转进去的，转染效率低，最高的不超过10%。
关于电位和粒径，我想问您一下：
如果要测电位和粒径，DNA浓度达到多少合适？我的基因是买的，不敢多用啊 ...

比转染低～具体看文献吧…

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-09-07 00:33:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)
你转的是EGFP？还是Luciferase？大质粒相对难转，说不定换个小一点的就会好一点。材料有时候不行就是不行。没办法的。
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
10楼2015-09-07 16:45:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 704361326 的主题更新
101/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:42 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 22:53 by cuPZTDXS3VOd
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-17 22:05 by cuPZTDXS3VOd
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 5/250 2026-09-17 14:05 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:05 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 12:39 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-17 05:50 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:04 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:04 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 19:15 by rRvxEj3zorCy
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭