应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » PAMAM类似的denderimer载吸附基因后转染问题
101/1返回列表
查看: 1557  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩

[求助] PAMAM类似的denderimer载吸附基因后转染问题 已有2人参与

本人合成一种新的材料，大体和PAMAM类似。做过了琼脂糖实验，可以吸附基因；也做了肝素提取实验和RNase抗降解实验，结果都可以。
转染进入细胞失败。
重复n多次了，对照品lipo可以转进去，但自己的材料携带基因后转不进细胞（A549，293T都试过）.
求高手指点！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
踏踏实实地走好自己的路
1楼 2015-09-01 15:22:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
自己先顶一下。
求制剂做基因的同行们指导指导。
不胜感激！
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
2楼2015-09-01 15:24:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 好专业，不明觉厉！ 2015-09-04 21:44:15
704361326: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-06 20:38:19
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
3楼2015-09-02 12:32:32
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybrjack

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 不懂，顶一下！ 2015-09-04 21:44:31
704361326: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-06 20:42:16
电位，要20mV，结合DNA粒径200nm一下，是不是材料太毒了？还是N\P太低了？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-02 23:55:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

这样啊。
你以前做过PEI吗？它的转染效率怎么样？
我不求多，50-70%都行。可我现在做的10%都不到啊
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
5楼2015-09-06 20:40:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

你有好的意见或建议吗？
我现在材料没法改，只能接着做的。。。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
6楼2015-09-06 20:41:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
4楼: Originally posted by ybrjack at 2015-09-02 23:55:43
电位，要20mV，结合DNA粒径200nm一下，是不是材料太毒了？还是N\P太低了？

谢谢您的回答！
材料毒性不大，远小于lipo，N/P比筛了很多，有转进去的，转染效率低，最高的不超过10%。
关于电位和粒径，我想问您一下：
如果要测电位和粒径，DNA浓度达到多少合适？我的基因是买的，不敢多用啊。。。。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
7楼2015-09-06 20:45:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsingyu at 2015-09-02 12:32:32
你要知道PAMAM本身的基因转染能力也是比较差的，你的材料和PAMAM类似，类似于PEI？就算是PEI以我们的标准也是差的。所以你没转出来一点都不奇怪。随便合成一个分子效果都很好的话，人家Lipo2000能卖这么贵？

PEI转染效率本身就低吗？PEI是两亲性的吗？
一般转染效率能达到多少？
我的是PAMAM类似物。
赞一下 回复此楼
踏踏实实地走好自己的路
8楼2015-09-06 20:53:01
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybrjack

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 704361326 at 2015-09-06 20:45:35
谢谢您的回答！
材料毒性不大，远小于lipo，N/P比筛了很多，有转进去的，转染效率低，最高的不超过10%。
关于电位和粒径，我想问您一下：
如果要测电位和粒径，DNA浓度达到多少合适？我的基因是买的，不敢多用啊 ...

比转染低～具体看文献吧…

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-09-07 00:33:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsingyu

木虫 (正式写手)
你转的是EGFP？还是Luciferase？大质粒相对难转，说不定换个小一点的就会好一点。材料有时候不行就是不行。没办法的。
赞一下 回复此楼
做最好的自己~
10楼2015-09-07 16:45:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 704361326 的主题更新
101/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +16 晴天加油 2026-08-26 18/900 2026-09-02 09:39 by 昵称告罄
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +5 瞬息宇宙 2026-08-31 8/400 2026-09-02 09:37 by 昵称告罄
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +3 瞬息宇宙 2026-09-01 5/250 2026-09-02 08:01 by anjeeshine
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭