应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带？？
251/1返回列表
查看: 1290  |  回复: 24
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

淘七九懒

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带？？

如题，在大肠JM109中用red同源重组做敲除时，电入扩增好的片段，然后PCR验证是否敲除成功。照理说无论是否敲除成功，都该有条带的（若成功，该是1500bp;不成功，该是基因大小）。可我的PCR结果是阳性对照（肯定含该基因的菌）都有基因大小的条带，做了电击的都没有条带。。。然后我提基因组验证，有的敲除成功，可是抗性一直消不掉。
有以下问题：我的pcr是用95度10min预变性，95度30s变性。而且阳性对照都出了很好的条带，为甚么做了电击的菌做菌落pcr就没东西出来？而提了基因组又能有条带的？为啥后面消抗老不长？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2015-08-31 15:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyl-1

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
简单回复
dmbb2楼
2015-08-31 15:57   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
211001123楼
2015-08-31 15:57   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
lirongj4楼
2015-08-31 15:59   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
hydzp5楼
2015-08-31 16:00   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
a
zhangzhiguang6楼
2015-08-31 16:07   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
omnist7楼
2015-08-31 16:08   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
xumeil8楼
2015-08-31 16:10   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
huangjingz9楼
2015-08-31 16:11   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
支持
xinyangjs10楼
2015-08-31 16:14   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
muqingh11楼
2015-08-31 16:15   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
假大空12楼
2015-08-31 16:19   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
zhangliyuanr13楼
2015-08-31 16:20   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
mogetp14楼
2015-08-31 16:20   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
zhongqij15楼
2015-08-31 16:21   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
libo56v16楼
2015-08-31 16:21   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
mingfengb17楼
2015-08-31 16:21   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
yuli39m18楼
2015-08-31 16:21   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
支持
jingranb19楼
2015-08-31 16:21   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
kiss2008553720楼
2015-08-31 16:24   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
nono200921楼
2015-08-31 16:24   回复  
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
liucheng88322楼
2015-08-31 16:25   回复  
zhchzhsh207623楼
2015-08-31 16:27   回复  
祝福
yudit24楼
2015-08-31 16:36   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 淘七九懒 的主题更新
251/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭