| 查看: 1423 | 回复: 24 | |||
[交流]
red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带？？
|
|||
|
如题，在大肠JM109中用red同源重组做敲除时，电入扩增好的片段，然后PCR验证是否敲除成功。照理说无论是否敲除成功，都该有条带的（若成功，该是1500bp;不成功，该是基因大小）。可我的PCR结果是阳性对照（肯定含该基因的菌）都有基因大小的条带，做了电击的都没有条带。。。然后我提基因组验证，有的敲除成功，可是抗性一直消不掉。 有以下问题：我的pcr是用95度10min预变性，95度30s变性。而且阳性对照都出了很好的条带，为甚么做了电击的菌做菌落pcr就没东西出来？而提了基因组又能有条带的？为啥后面消抗老不长？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有134人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带？？
已经有2人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
坐标广州，征女友
+2/138
-
南京大学医工交叉方向招聘脂质纳米材料与RNA递送方向博士后1-2名
+1/85
-
南京大学医工交叉方向薛璐璐团队招聘脂质纳米材料与RNA递送方向博士后1-2名
+1/82
-
采用本质安全型氢气流量控制的化学合成 - Alicat ISMC本安防爆质量流量控制器
+2/78
-
Postdoctoral fellow in Medicinal Chemistry, McGill University
+1/71
-
祈福面上好运，散金币
+1/44
-
大连理工大学化学学院界面介导黏附与组装课题组招收2027级推免生/考研生
+1/29
-
大连理工大学化学学院界面介导黏附与组装课题组招收推免生
+1/27
-
招生宣讲会倒计时！7月29日20：00，不见不散！
+1/10
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/9
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/9
-
四川大学周加境课题组招博士研究生/研究助理（自组装材料/生物医学方向）
+1/6
-
新西兰坎特伯雷大学招博士后
+1/6
-
多本Scopus收录国际英文期刊征稿，全免 APC！含医学期刊
+1/5
-
国家自然科学基金申报者发榜前心理状态调查，麻烦帮忙填一下哇！
+1/5
-
北京师范大学（珠海校区）赵亚然副教授招收2027年电催化硕士/博士研究生
+1/3
-
国际 EI 会议征稿进行时
+1/2
-
分不清 EI 会议 CA 和 JA？90% 投稿人踩过的检索大坑
+1/2
-
有没有管理类博士招生
+1/1
-
这些Scopus收录的英文国际期刊正在征稿（快速审稿）2026年底前免APC！
+1/1
25楼2015-12-15 17:14:43
简单回复
dmbb2楼
2015-08-31 15:57
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
211001123楼
2015-08-31 15:57
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
lirongj4楼
2015-08-31 15:59
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
hydzp5楼
2015-08-31 16:00
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
a
2015-08-31 16:07
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
omnist7楼
2015-08-31 16:08
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
xumeil8楼
2015-08-31 16:10
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
2015-08-31 16:11
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
支持
xinyangjs10楼
2015-08-31 16:14
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
muqingh11楼
2015-08-31 16:15
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
假大空12楼
2015-08-31 16:19
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
zhangliyuanr13楼
2015-08-31 16:20
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
mogetp14楼
2015-08-31 16:20
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
zhongqij15楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
libo56v16楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
mingfengb17楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
yuli39m18楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
支持
jingranb19楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
kiss2008553720楼
2015-08-31 16:24
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
nono200921楼
2015-08-31 16:24
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
liucheng88322楼
2015-08-31 16:25
回复
zhchzhsh207623楼
2015-08-31 16:27
回复
祝福
yudit24楼
2015-08-31 16:36
回复
