| 查看: 1289 | 回复: 24 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[交流]
red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带??
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
如题,在大肠JM109中用red同源重组做敲除时,电入扩增好的片段,然后PCR验证是否敲除成功。照理说无论是否敲除成功,都该有条带的(若成功,该是1500bp;不成功,该是基因大小)。可我的PCR结果是阳性对照(肯定含该基因的菌)都有基因大小的条带,做了电击的都没有条带。。。然后我提基因组验证,有的敲除成功,可是抗性一直消不掉。 有以下问题:我的pcr是用95度10min预变性,95度30s变性。而且阳性对照都出了很好的条带,为甚么做了电击的菌做菌落pcr就没东西出来?而提了基因组又能有条带的?为啥后面消抗老不长?? |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线:以精准检测,护健康基石
已经有0人回复
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有215人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
蛋白质检测:精准分析,解锁生物分子的密码
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之小鼠实验:严谨设计,解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之重金属检测:精准筛查,守护健康与环境的防线
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:
red同源重组做敲除时 电入片段后pcr无条带??
已经有2人回复
» 抢金币啦!回帖就可以得到:
DIY科研工具交流
+1/222
87 年东北小哥定居苏州/杭州/上海,诚寻携手余生的你
+1/167
新加坡国立大学张阳教授课题组招聘博士后(AI与生物医学方向)
+1/139
【CSC招生】荷兰莱顿大学医学中心LKEB图像处理实验室 招收2026年CSC博士生多名
+1/82
真诚相亲
+1/62
江西农业大学与中国农业科学院联合培养博士招生1名
+5/60
北京科技大学机械工程学院谢贵久教授课题组2026年博士/硕士研究生招生
+2/46
北京某医药CRO公司招聘多肽/高分子/连续流合成经理
+1/44
哈工大深圳校区 博士招生 燃料电池/电解制氢
+1/32
SCI文章辅助,无人机、计算机网络通信、算法方向
+1/21
SCI文章辅助,无人机、计算机网络通信、算法方向
+1/17
2026申博自荐 本硕双一流学科 纳米药物递送方向 一篇一区TOP 两个国家奖学金
+1/14
26年-考博求助
+1/11
湖南师范大学分子识别与荧光传感团队招收2026年“申请-考核” 制博士研究生1名
+1/11
2026年-中国科学院环境分析化学方向“申请考核”博士生
+1/7
浙江大学吕志民课题组招生/招聘启事-本招聘长期有效
+1/6
德国马普所招三名CSC博士生
+1/5
浙江工业大学朱艺涵优青团队“能源电池/催化电镜表征与材料创制”招收2026年博士生
+1/3
【长期有效】北理工柔性电子国家杰青团队招博士后
+1/2
【长期有效 】北理工柔性电子国家杰青团队招博士后&科研助理
+1/1
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
简单回复
dmbb2楼
2015-08-31 15:57
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
211001123楼
2015-08-31 15:57
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
lirongj4楼
2015-08-31 15:59
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

祝福
hydzp5楼
2015-08-31 16:00
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
a
2015-08-31 16:07
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
omnist7楼
2015-08-31 16:08
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

xumeil8楼
2015-08-31 16:10
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
2015-08-31 16:11
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

支持
xinyangjs10楼
2015-08-31 16:14
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
muqingh11楼
2015-08-31 16:15
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

假大空12楼
2015-08-31 16:19
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与


zhangliyuanr13楼
2015-08-31 16:20
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

mogetp14楼
2015-08-31 16:20
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

zhongqij15楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
祝福
libo56v16楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

mingfengb17楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

yuli39m18楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

支持
jingranb19楼
2015-08-31 16:21
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与

kiss2008553720楼
2015-08-31 16:24
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
nono200921楼
2015-08-31 16:24
回复
淘七九懒(金币+2): 谢谢参与
liucheng88322楼
2015-08-31 16:25
回复
zhchzhsh207623楼
2015-08-31 16:27
回复
祝福
yudit24楼
2015-08-31 16:36
回复














回复此楼