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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。 已有9人参与

求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。求指教！！

求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。
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1楼 2015-08-25 10:20:14
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amay0001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
呦呦奶茶: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-08-26 21:58:35
PCR: 退火温度就定56度，先看到条带再说
胶：我买过299的微波炉，跟导师商量一下还是配一个吧，很影响进度的。片段多大？2%的浓度太高了，一般200bp的1%的胶PCR产物没问题。
上样：PCR产物一般DNA浓度高，上样量3-5ul看结果即可
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12楼2015-08-26 09:38:15
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请给出你的反应程序和反应体系
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4楼2015-08-25 14:41:39
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:43:54
marker看不出来，说明肯定是胶的问题。你融化琼脂糖的时候，试试延长一点加热时间，比如微波炉1min
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5楼2015-08-25 20:55:06
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-08-25 14:41:39
请给出你的反应程序和反应体系

体系是Mix12.5，引物各0.5微升，DNA模板1微升，最后定容到25微升，
反应过程我这个是94度5分钟，94度一分钟，退火温度是从56到62跑了个梯度，然后72度一分钟，35个循环，最后72度跑五分钟。
胶是2%的，电压80V非常感谢！！！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2015-08-26 00:13:44
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