24小时热门版块排行榜    

查看: 1200  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

erin090506

新虫 (小有名气)

[求助] 求助,想直接换掉构建好的载体上的目的基因,听说有一种融合的技术,不需酶切? 已有2人参与

求助大家,我手里有一个构建好的载体,想直接换掉目的基因,但是测序后发现基因前后片段很小,没有酶切位点。
是不是有一种通过PCR,融合技术换掉载体上目的基因的方法,应该怎么操作,有没有相关的文献推荐。谢谢!
回复此楼
实实在在做科研
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

那雨那女孩

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by mao081312 at 2016-01-17 23:53:25
可以的,这种比例很常见的
...

太谢谢了!!!我还有不懂的地方,就是,我的载体是用酶切的,粘性末端只有6个,但是,设计引物的时候,要与载体重复15bp左右,还有9个左右的碱基是多出来的,我就想问,无缝连接是沿载体复制一圈呢,还是只复制目的基因部分,然后与线性载体相连?

发自小木虫Android客户端
辟邪
9楼2016-01-18 01:12:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
erin090506: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-25 10:27:20
你又没提前设置gateway位点,老老实实酶切连接吧,那个快

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-24 12:03:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
erin090506: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2015-08-25 10:27:42
无缝克隆,现在国产的很多。
3楼2015-08-24 22:44:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erin090506

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-08-24 12:03:24
你又没提前设置gateway位点,老老实实酶切连接吧,那个快

又一次涨知识了。都没有听说过gateway位点。谢谢这位大侠
实实在在做科研
4楼2015-08-25 10:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 求调剂 +6 yunziaaaaa 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by @飒飒飒飒
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +7 YXCT 2026-03-01 8/400 2026-03-02 10:37 by YXCT
[考研] 284求调剂 +9 天下熯 2026-02-28 10/500 2026-03-02 10:29 by 公瑾逍遥
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 材料工程269求调剂 +3 白刺玫 2026-03-02 3/150 2026-03-02 09:25 by 一休哥FU
[考研] 282求调剂 +3 2103240126 2026-03-02 4/200 2026-03-02 09:25 by 汪!?!
[考研] 085600 英一数二272求调剂 5+3 vida_a 2026-03-01 7/350 2026-03-02 07:51 by ms629
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
信息提示
请填处理意见