24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1523  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

无忌2013

金虫 (正式写手)

[求助] 质粒转染和扩增

大家好,请教个问题:最近做了质粒扩增和转染,瞬转稳转都做了,瞬转48h后跑蛋白发现和空质粒组比较没有高表达,检查发现质粒扩增时加错了抗生素(应该是大观霉素,但是加了卡那霉素),那么会因为加错抗生素杀死带目的质粒的菌导致的实验失败吗?求各位前辈知道一二,非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

工作中
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无忌2013

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by for5 at 2015-08-21 15:44:51
最好检验一下是不是你的质粒。
前提当然你抗生素是加错了。不过你如果检验了提出来质粒没问题,那下面的转染就和你之前的扩增没关系了。
转染的时候操作也没问题的话,那就只能是蛋白没表达。
但是你说GFP没表达 ...

说的对,应该检验下质粒,下次我重新做一次
工作中
5楼2015-08-21 16:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

for5

木虫 (正式写手)

那你质粒扩增加错抗生素后质粒提出来了吗?有没有检验?
操蛋的XX
2楼2015-08-21 15:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无忌2013

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by for5 at 2015-08-21 15:35:53
那你质粒扩增加错抗生素后质粒提出来了吗?有没有检验?

提出来了,没检验直接转染,但看不到绿色荧光
工作中
3楼2015-08-21 15:39:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

for5

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无忌2013 at 2015-08-21 15:39:11
提出来了,没检验直接转染,但看不到绿色荧光...

最好检验一下是不是你的质粒。
前提当然你抗生素是加错了。不过你如果检验了提出来质粒没问题,那下面的转染就和你之前的扩增没关系了。
转染的时候操作也没问题的话,那就只能是蛋白没表达。
但是你说GFP没表达,还是先检验质粒有没有问题吧,然后在考虑转染是不是有问题。
瞬转不需要抗生素。
操蛋的XX
4楼2015-08-21 15:44:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 +7 妮妮ninicgb 2026-03-27 7/350 2026-03-28 11:20 by Awei099
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +6 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 03:51 by fmesaito
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +10 幸运的酱酱 2026-03-22 12/600 2026-03-27 16:08 by muchong357
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +9 vv迷 2026-03-22 9/450 2026-03-27 15:59 by 不吃魚的貓
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +3 IceGuo 2026-03-26 4/200 2026-03-27 05:35 by user003
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
信息提示
请填处理意见