应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 重叠（融合）PCR遇到的问题
汕头大学海洋科学接受调剂
161/2返回列表12下一页
查看: 2846  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Lily丶

铁虫 (小有名气)

[求助] 重叠（融合）PCR遇到的问题 已有6人参与

最近小虫正在做三片段的融合PCR,暂且将这三个片段称为A,B,C.先PCR产物液回收了各片段，并且融合出了疑似三片段一起的长片段ABC.然后对长片段做鉴定时，能够扩出A,B,C三个小片段，但却不能以融合的长片段为模板来扩出长片段，请问这是什么原因呐？！求指教～

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-11 23:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ppppppppp

新虫 (小有名气)
楼主你怎么和我遇到的问题惊人的相似啊。
赞一下(2人) 回复此楼
初来乍到，请多指教
3楼2015-08-12 12:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Lily丶: 金币+1 2015-08-13 10:07:59
先两个连，再连第三个

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2015-08-12 13:30:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Lily丶: 金币+1, ★有帮助 2015-08-13 07:50:17
ABC是胶回收吗，还有鉴定ABC，最好的办法是测序。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-08-12 11:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

人车

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Lily丶: 金币+1 2015-08-13 10:21:03
你说的出现了疑似融合的片段有电泳图之类的吗？  你鉴定的时候引物用的是什么呢？
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-12 14:39:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gongeleven at 2015-08-12 11:41:40
ABC是胶回收吗，还有鉴定ABC，最好的办法是测序。

各片段A、B、C是采用的PCR产物直接液回收，没用切胶回收~
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-13 10:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ppppppppp at 2015-08-12 12:59:15
楼主你怎么和我遇到的问题惊人的相似啊。

你也是鉴定不出长片段吗？
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-13 10:07:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunqx at 2015-08-12 13:30:16
先两个连，再连第三个

我感觉我是三个片段融合上了的，只是不能用融合的再来扩出长片段~
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-13 10:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 人车 at 2015-08-12 14:39:51
你说的出现了疑似融合的片段有电泳图之类的吗？  你鉴定的时候引物用的是什么呢？

第一张图片是ABC的融合，第二张是切胶回收ABC长片段，第三张是PCR鉴定各小片段以及长片段~
重叠（融合）PCR遇到的问题
1.G148-1769 LSR融合PCR.jpg


重叠（融合）PCR遇到的问题-1
3.G148-1769 LSR各片段鉴定.jpg


重叠（融合）PCR遇到的问题-2
2.G148-1769 LSR切胶回收 .jpg
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-13 10:19:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人车

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Lily丶 at 2015-08-13 10:19:03
第一张图片是ABC的融合，第二张是切胶回收ABC长片段，第三张是PCR鉴定各小片段以及长片段~

1.G148-1769 LSR融合PCR.jpg

3.G148-1769 LSR各片段鉴定.jpg

2.G148-1769 LSR切胶回收 .jpg
...

不知道你的MARKER是多少 通过第二张图相加和第一个图的大小是一样的吗？ 你验证长片段的时候是两端用的AC两侧引物进行的吗？
赞一下 回复此楼
10楼2015-08-13 14:19:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Lily丶 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +26 慕绝cc 2026-04-09 30/1500 2026-04-14 18:50 by 蔡苏阳
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +42 @ASDF1234 2026-04-08 46/2300 2026-04-14 18:12 by 逍遥三郎
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +21 hualkop 2026-04-12 22/1100 2026-04-14 17:44 by lhj2009
[考研] 0854调剂 +11 长弓傲 2026-04-12 14/700 2026-04-14 16:07 by 逆水乘风
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +18 振—TZ 2026-04-10 19/950 2026-04-14 10:34 by screening
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线，员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 调剂 +12 卷卷卷心菜_ 2026-04-09 13/650 2026-04-10 22:36 by Ftglcn90
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 一志愿沪9，326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭