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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 重叠（融合）PCR遇到的问题
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Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 人车 at 2015-08-13 14:19:47
不知道你的MARKER是多少 通过第二张图相加和第一个图的大小是一样的吗？ 你验证长片段的时候是两端用的AC两侧引物进行的吗？...

其中有个marker是2000，另一个是15000。是用的A的上游引物和C的下游引物作为长片段的引物的～
A有618bp B有1145bp C有657bp
按理说长片段就大概2.4k左右～正好与第一张图的条带位置大概相似～

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11楼2015-08-13 18:38:38
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Lily丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 人车 at 2015-08-13 14:19:47
不知道你的MARKER是多少 通过第二张图相加和第一个图的大小是一样的吗？ 你验证长片段的时候是两端用的AC两侧引物进行的吗？...

第三张图是胶回收的第一张图的长片段，用的15000的marker,倒数第三条带就是2500

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12楼2015-08-13 18:40:09
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小王叨叨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也遇到楼主一样的问题，不知道楼主找到原因了没有？
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13楼2015-12-07 22:09:11
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chengjie0801

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主最后做出来了吗？我也是融合3个片段，第一步融合后有几条带，目的条带不明显，将融合的产物作为模板扩增后，出现弥散条带。请问楼主是怎么做的？能告知条件吗？
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14楼2016-03-10 13:27:14
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鱼虾水中游

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主能回复一下，你的反映条件吗？谢谢！
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梦想在心中，更在脚下！
15楼2016-05-11 10:41:37
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奥利奥有木有

新虫 (初入文坛)
请问楼主解决了吗?我现在遇到了相同的问题
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16楼2016-06-23 08:39:47
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