应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 煮蛋白样时忘加loading buffer了
111/2返回列表12下一页
查看: 17193  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

上帝的饮料

新虫 (初入文坛)

[求助] 煮蛋白样时忘加loading buffer了 已有7人参与

脑子抽了，没加loading buffer直接去煮了10min，后来想起来就又加了loading buffer煮了5min，还能用吗？我感觉分析一下loading buffer的作用倒是可以，谁做过
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-09 17:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
上帝的饮料: 金币+2, ★有帮助 2015-08-12 09:19:45
本帖内容被屏蔽
4楼2015-08-09 18:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
上帝的饮料: 金币+1, ★有帮助, thanks 2015-08-12 09:19:21
2*SDS loading buffer
tris-hcl/sds/dtt/BME
缓冲（稳定）／变性／上样辅助
赞一下(1人) 回复此楼
活着就要让人感受到你的存在。
7楼2015-08-10 09:44:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
loading buffer的主要作用有两个，指示剂；携带你的样本沉到孔的底部，但一般buffer里都会加蛋白抑制剂，刚开始煮的那10分钟会不会已经把蛋白给降解了呀？你倒是可以试着做一下，看蛋白量及电泳效果怎么样，说不定有新发现
赞一下 回复此楼
医学&统计学
2楼2015-08-09 17:43:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上帝的饮料

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-08-09 17:43:29
loading buffer的主要作用有两个，指示剂；携带你的样本沉到孔的底部，但一般buffer里都会加蛋白抑制剂，刚开始煮的那10分钟会不会已经把蛋白给降解了呀？你倒是可以试着做一下，看蛋白量及电泳效果怎么样，说不定有 ...

望大神指点。loading buffer里什么是蛋白抑制剂啊，高温煮沸不会破坏蛋白酶的活性吗？
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-09 18:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

上帝的饮料

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 18:59:24
没碰到过，不过你的样品直接煮过后应该有沉淀吧，那别扔，就按你自己说的做，死马当活马医了呗。我们的loading buffer里从来不加抑制剂

今天晚上试了一下，没啥问题，算是积累了一个经验吧
赞一下 回复此楼
5楼2015-08-09 23:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
上帝的饮料: 金币+1, ★有帮助, 是的 2015-08-12 09:19:58
Loading buffer一方面是只是的作用 另一方面是变性剂，它里面含有的巯基乙醇是很好的蛋白变性剂。高温煮也是为了让蛋白变性。他们的作用是一样的
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-10 08:38:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcuwxy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
又长见识了······感谢LZ
赞一下 回复此楼
8楼2015-08-10 12:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by xujian568 at 2015-08-10 09:44:18
2*SDS loading buffer
tris-hcl/sds/dtt/BME
缓冲（稳定）／变性／上样辅助

DTT/BME是为了打开二硫键，还有甘油才是辅助上样。煮沸是为了变性和打开二硫键，但没有SDS和还原剂的话只会变性沉淀。
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-11 05:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没事的，重新加了煮下就好。反正都是变性电泳，没问题的，早晚都会变性的
赞一下 回复此楼
10楼2015-08-11 09:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 上帝的饮料 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学338求调剂！ +3 Zuhui0306 2026-03-26 3/150 2026-03-26 16:52 by 吞噬星空996
[考研] 265求调剂 +13 梁梁校校 2026-03-19 15/750 2026-03-26 16:21 by 不吃魚的貓
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭