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煮蛋白样时忘加loading buffer了
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上帝的饮料
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煮蛋白样时忘加loading buffer了
已有7人参与
脑子抽了,没加loading buffer直接去煮了10min,后来想起来就又加了loading buffer煮了5min,还能用吗?我感觉分析一下loading buffer的作用倒是可以,谁做过
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1楼
2015-08-09 17:23:03
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上帝的饮料
新虫
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2楼
:
Originally posted by
董博士
at 2015-08-09 17:43:29
loading buffer的主要作用有两个,指示剂;携带你的样本沉到孔的底部,但一般buffer里都会加蛋白抑制剂,刚开始煮的那10分钟会不会已经把蛋白给降解了呀?你倒是可以试着做一下,看蛋白量及电泳效果怎么样,说不定有 ...
望大神指点。loading buffer里什么是蛋白抑制剂啊,高温煮沸不会破坏蛋白酶的活性吗?
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3楼
2015-08-09 18:11:42
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董博士
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
loading buffer的主要作用有两个,指示剂;携带你的样本沉到孔的底部,但一般buffer里都会加蛋白抑制剂,刚开始煮的那10分钟会不会已经把蛋白给降解了呀?你倒是可以试着做一下,看蛋白量及电泳效果怎么样,说不定有新发现
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医学&统计学
2楼
2015-08-09 17:43:29
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ghqiu09
禁虫
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有帮助
2015-08-12 09:19:45
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4楼
2015-08-09 18:59:24
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4楼
:
Originally posted by
ghqiu09
at 2015-08-09 18:59:24
没碰到过,不过你的样品直接煮过后应该有沉淀吧,那别扔,就按你自己说的做,死马当活马医了呗。我们的loading buffer里从来不加抑制剂
今天晚上试了一下,没啥问题,算是积累了一个经验吧
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5楼
2015-08-09 23:54:08
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