24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1333  |  回复: 16

13steve

银虫 (初入文坛)

[求助] 求指点新手提RNA技术 已有3人参与

新手上路,刚提了一次虫子的rna,听说胶图有三条带才能用,我的只有两条,另外测的浓度在1000左右吧,260/230比较低,在1、5左右,260/280大约能在1·8到2·0之间吧,求教改进方法。

求指点新手提RNA技术
dell 2015-07-26 23hr 01min.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-28 22:57:29
虫子的RNA,有可能只有一条带,你的这个就是量低了点,活虫用液氮速冻,
然后-80保存,干冰运输,或者活体运输,用液氮研磨,1分钟研磨完成。
然后就速战速决,电泳的话,换新的电泳缓冲液就行,时间电泳无特殊要求。
80-180V电压随便选,时间对应为35min-18min,有疑问随便问。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

有你真好
7楼2015-07-28 15:07:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-28 22:57:17
降解了,建议跑电泳时电压大一些,时间控制住10-15分钟,再看看。看看是哪一步降解了。
5楼2015-07-28 10:05:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yufeiwaner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-28 22:57:43
你的样品应该够新鲜的,要注意低温破碎。提取RNA,氯仿振荡那一步特别重要,振荡要激烈,离心后坚决不能吸到沉淀。
8楼2015-07-28 16:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
降解成这样,还是重来吧

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-07-27 23:24:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13steve

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-27 23:24:35
降解成这样,还是重来吧

嗯,请问胶图正常的话我的mRNA应该是在什么位置?
3楼2015-07-28 08:51:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

真是疯了,mRNA跑电泳,好浪费啊

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-07-28 08:53:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
13steve: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2015-07-28 17:34:18
楼上别闹,瞎说,看到图只能说,且做且珍惜。
提取RNA根本都不难,我觉得你应该提取的是总RNA,市场上买的试剂盒多的去了。
进口的一大推TAKARA,QIGEN等,国产的全式金,康为, 天恩,生工等,随便哪个提取的总RNA质量都是杠杠的,
这些本人都用过。
条带时3条带,真核生物28S、18S和5S,没有降解的RNA条带时28S亮度是18S亮度的2倍,5S很弱。
不懂的话,继续问吧,只要严格按照试剂盒说明书提取,速度能有多快有多快,降解往往是慢引起的,和温度关系不大。
有你真好
6楼2015-07-28 15:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13steve

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-07-28 08:53:59
真是疯了,mRNA跑电泳,好浪费啊

不用跑吗?只测浓度?
9楼2015-07-28 17:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

great07225388

新虫 (著名写手)

徒手裸提rna,绝对是技术活啊!

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-07-28 17:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 13steve 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 工科求调剂 +10 11ggg 2026-04-03 10/500 2026-04-03 22:35 by syjjj0321
[考研] 329求调剂 +9 miaodesi 2026-04-02 11/550 2026-04-03 18:28 by ls刘帅
[考研] 化学调剂 +9 艾志恒 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:51 by 晴空210210
[考研] 320求调剂 +5 振—TZ 2026-04-02 5/250 2026-04-03 14:42 by fxue1114
[考研] 生物学求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 3/150 2026-04-03 10:28 by macy2011
[考研] 309求调剂 +14 呆菇不是戴夫 2026-04-02 14/700 2026-04-03 09:42 by 蓝云思雨
[考研] 326求调剂 +3 9ahye 2026-04-02 4/200 2026-04-03 08:43 by Jaylen.
[考研] 求调剂推荐 +3 南山南@ 2026-04-01 3/150 2026-04-02 12:09 by xiaoranmu
[考研] 一志愿厦门大学化学工程(专硕)-数二英二406分-求调剂 +5 厦大化工 2026-04-01 5/250 2026-04-02 10:03 by jp9609
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 09:15 by olim
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +25 lllllos 2026-03-30 26/1300 2026-04-01 09:52 by 一只好果子?
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突, 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
[基金申请] 面上5B能上会吗? +8 redcom 2026-03-29 8/400 2026-03-31 15:53 by niuailing
信息提示
请填处理意见