应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升）
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1758  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小情绪你不懂

金虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升） 已有1人参与

如题、希望大神指点啊~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-27 17:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lance-tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小情绪你不懂 at 2015-07-28 10:15:48
PCR 反应体系25微升；PCR反应程序：94度预变性5min，35个循环（94度，1min，56度，30s，72度，1min），最终72度延伸7min；产物经1.2%琼脂糖电泳检测；
我的目的片段大概是450bp；
DGGE所有试剂都木有过期，同一块 ...

1.产物浓度不够，对后续DGGE影响较大
2.看下面都有引物二聚体了，可以适当增加模板浓度，提高一点退火温度试试看
建议把产物浓度调节好再上样，不然也是浪费时间。
赞一下 回复此楼
新手入门求各位大神指导
5楼2015-07-29 10:34:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lance-tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:24:13
1.PCR图片，以及扩增程序，体系，麻烦告知不然没办法分析
2.看你的目的片段是否大于500，如果大于500效果会较差
3.检查下你的DGGE凝胶是否过期
4.是否选择了正确的梯度
赞一下 回复此楼
新手入门求各位大神指导
2楼2015-07-28 09:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小情绪你不懂

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lance-tan at 2015-07-28 09:30:55
1.PCR图片，以及扩增程序，体系，麻烦告知不然没办法分析
2.看你的目的片段是否大于500，如果大于500效果会较差
3.检查下你的DGGE凝胶是否过期
4.是否选择了正确的梯度

PCR 反应体系25微升；PCR反应程序：94度预变性5min，35个循环（94度，1min，56度，30s，72度，1min），最终72度延伸7min；产物经1.2%琼脂糖电泳检测；
我的目的片段大概是450bp；
DGGE所有试剂都木有过期，同一块胶同门都跑出来了（所有操作均一样，样品我的是羊肉，他的是牛肉，但目的片段大概都是450bp）；
DGGE胶是43%-58%，浓缩胶为8%；
谢谢哈~~
PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升）
IMG_20150725_181803.jpg
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-28 10:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng37ye

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:24:38
来交流的。产物浓度不高，若是加了loading buffer后上样20的话样品太少。如果DGGE上样空有亮带的话也可能没有条带。请问DGGE跑了多久？会不会是染色的问题？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-28 16:26:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404总分289，求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-04-04 21:43 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 20:49 by 蓝云思雨
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 277工科求调剂 +7 1915668 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:21 by 啊俊！
[考研] 291求调剂 +4 迷蒙木木 2026-04-01 5/250 2026-04-04 15:59 by sihailian3
[考研] 271分求调剂学校 +11 zph158488！ 2026-04-02 11/550 2026-04-04 01:06 by userper
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 化工调剂303分，过四级 +28 栖梧待风 2026-04-02 28/1400 2026-04-03 21:40 by qlm5820
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-03 16:46 by wxiongid
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 289求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 5/250 2026-04-03 10:09 by 不168
[考研] 0703化学 +7 goldtt 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:36 by 蓝云思雨
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 求调剂 302分初试 0854 +5 伶可乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 17:53 by 笔落锦州
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 290求调剂 +5 dfffsar 2026-03-29 5/250 2026-04-01 19:45 by 6781022
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:35 by wangjy2002
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭