应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升）
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1756  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小情绪你不懂

金虫 (小有名气)

[求助] PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升） 已有1人参与

如题、希望大神指点啊~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-27 17:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小情绪你不懂

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lance-tan at 2015-07-28 09:30:55
1.PCR图片，以及扩增程序，体系，麻烦告知不然没办法分析
2.看你的目的片段是否大于500，如果大于500效果会较差
3.检查下你的DGGE凝胶是否过期
4.是否选择了正确的梯度

PCR 反应体系25微升；PCR反应程序：94度预变性5min，35个循环（94度，1min，56度，30s，72度，1min），最终72度延伸7min；产物经1.2%琼脂糖电泳检测；
我的目的片段大概是450bp；
DGGE所有试剂都木有过期，同一块胶同门都跑出来了（所有操作均一样，样品我的是羊肉，他的是牛肉，但目的片段大概都是450bp）；
DGGE胶是43%-58%，浓缩胶为8%；
谢谢哈~~
PCR后跑琼脂糖电泳有DNA条带、为什么跑DGGE胶没有任何条带？？（加样20微升）
IMG_20150725_181803.jpg
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-28 10:15:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lance-tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:24:13
1.PCR图片，以及扩增程序，体系，麻烦告知不然没办法分析
2.看你的目的片段是否大于500，如果大于500效果会较差
3.检查下你的DGGE凝胶是否过期
4.是否选择了正确的梯度
赞一下 回复此楼
新手入门求各位大神指导
2楼2015-07-28 09:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng37ye

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-30 23:24:38
来交流的。产物浓度不高，若是加了loading buffer后上样20的话样品太少。如果DGGE上样空有亮带的话也可能没有条带。请问DGGE跑了多久？会不会是染色的问题？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-28 16:26:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lance-tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小情绪你不懂 at 2015-07-28 10:15:48
PCR 反应体系25微升；PCR反应程序：94度预变性5min，35个循环（94度，1min，56度，30s，72度，1min），最终72度延伸7min；产物经1.2%琼脂糖电泳检测；
我的目的片段大概是450bp；
DGGE所有试剂都木有过期，同一块 ...

1.产物浓度不够，对后续DGGE影响较大
2.看下面都有引物二聚体了，可以适当增加模板浓度，提高一点退火温度试试看
建议把产物浓度调节好再上样，不然也是浪费时间。
赞一下 回复此楼
新手入门求各位大神指导
5楼2015-07-29 10:34:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕283求调剂 +8 试试看呗 2026-04-04 9/450 2026-04-04 22:30 by lbsjt
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600，求调剂 +22 吃的不少 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 22:25 by hemengdong
[考研] 292分，材料与化工，申请调剂 +22 程晴之 2026-04-01 26/1300 2026-04-04 22:03 by hemengdong
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 085601，一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 283分求调剂 +5 试试看呗 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:06 by dongzh2009
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突， 2026-03-31 4/200 2026-04-04 13:34 by 1753564080
[考研] 322求调剂 +6 FZAC123 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:23 by 科研小专家
[考研] 085601一志愿北理325分求调剂 +6 找调剂，， 2026-04-02 6/300 2026-04-03 22:20 by 柟�?
[考研] 复试调剂 +5 春日来信- 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:01 by buqi613
[考研] 307分求调剂 +14 (o~o) 2026-03-31 15/750 2026-04-01 20:43 by longlotian
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +7 @taotao 2026-03-30 7/350 2026-04-01 14:30 by chenqifeng666
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 求调剂：一志愿：南京大学 专业：0705 总分320 ，本科985，四六级已过 +3 lfy760306 2026-03-31 3/150 2026-04-01 01:57 by Creta
[考研] 本科211总分289，08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭