| 查看: 1128 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
如何获得一段约127bp的DNA双链片段？ 已有1人参与
|
||
|
各位虫右：我最近构建质粒需要将一段约127bp的片段连入载体（载体使用两个限制性内切酶酶切处理），现在比较纠结以下两种办法：①设计两条互搭长引物，将引物直接退火，形成双链DNA片段（两端有与载体相同的粘性末端），可以直接连入载体。但有一个问题是长引物直接互搭的效率如何？会不会得到引物二聚体的可能性更高？ ②第二种办法是利用PCR扩增出这条127bp的DNA片段连入T载体后，利用相同的限制性内切酶酶切后连入载体。但存在的问题是127bp的DNA片段的回收问题，片段太小是否不易回收？希望有经验的虫虫能帮助一下！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有65人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
3楼2015-07-19 16:53:00
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2015-07-19 16:14:28
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2015-07-19 23:10:53
5楼2018-03-10 07:11:42
100