| 查看: 1089 | 回复: 4 | ||
[求助]
如何获得一段约127bp的DNA双链片段？ 已有1人参与
|
|
各位虫右：我最近构建质粒需要将一段约127bp的片段连入载体（载体使用两个限制性内切酶酶切处理），现在比较纠结以下两种办法：①设计两条互搭长引物，将引物直接退火，形成双链DNA片段（两端有与载体相同的粘性末端），可以直接连入载体。但有一个问题是长引物直接互搭的效率如何？会不会得到引物二聚体的可能性更高？ ②第二种办法是利用PCR扩增出这条127bp的DNA片段连入T载体后，利用相同的限制性内切酶酶切后连入载体。但存在的问题是127bp的DNA片段的回收问题，片段太小是否不易回收？希望有经验的虫虫能帮助一下！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有168人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2015-07-19 16:14:28
3楼2015-07-19 16:53:00
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2015-07-19 23:10:53
5楼2018-03-10 07:11:42
10