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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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mahui0224

铜虫 (初入文坛)

[求助] ELISA标准品稀释问题 已有4人参与

请问:在ELISA实验中,我之前都是把标准品从最高浓度2倍稀释,后来发现曲线拟合不是很好,就改为3倍稀释,例如从2000ng/ml开始,3倍、9倍、27倍、、、、这样稀释,和以前2倍、4倍、8倍、、、、稀释,对同个蛋白定量计算出来的浓度一样吗?最近很纠结这个问题,请高手指教,谢谢!
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追求积极向上的生活
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emily_2011

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般2倍或3倍稀释法都是可以的。线性拟合的好坏主要是看浓度设定,与拐点相接近,线性拟合才会好。所以,一般你可以初步设定一下你的ic50,然后先不规律设置6-7个点,初步拟合一下曲线。如0.1、0.5、1、2、5、10、20、50、100 ng/ml, 然后再优化你的稀释比例。

希望对你有帮助
6楼2015-07-20 10:54:13
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duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
理论上如何稀释的应该没有影响,重点是你设定的线性范围合适就好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-07-16 15:13:51
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mahui0224

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by duliuhui at 2015-07-16 15:13:51
理论上如何稀释的应该没有影响,重点是你设定的线性范围合适就好。

是的,今天做看个实验,事实证明是没有问题的
追求积极向上的生活
3楼2015-07-16 16:04:44
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feixuan2012

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般ELISA的标曲会设置8个浓度点,通常至少要有4个浓度点在曲线的对数区域,而且对于样品来说也最好落在该区域,这样测量的批间差异就不会很大.
4楼2015-07-16 16:14:26
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