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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » mRNA表达，但检测不到蛋白
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)

[求助] mRNA表达，但检测不到蛋白 已有2人参与

各位虫友好，我在扩增基因时偶然发现一条小片段，测序后发现其结构和mRAN相似，所以想验证一下其功能。因为没有特异抗体，故构建了HA融合载体超表达细胞。检测发现，mRNA水平超表达明显，但蛋白水平一直检测不到。定量检测，表明细胞中确实存在该片段。想问，这是什么原因呢，一直检测不到蛋白（HA标签载体是没问题的，其他基因都能检测到），难道是不翻译吗，还是什么其他原因，请各位指教！**！
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1楼 2015-07-14 09:32:09
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-17 22:53:17
很可能在翻译过程中被降解掉了或者出现其他问题是我们所不了解的，之前也遇过某个基因做了低表达后，mRNA有降低，但蛋白却没变化
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医学&统计学
2楼2015-07-17 12:39:26
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-07-17 12:39:26
很可能在翻译过程中被降解掉了或者出现其他问题是我们所不了解的，之前也遇过某个基因做了低表达后，mRNA有降低，但蛋白却没变化

多谢。那有什么试验方法可以继续研究这个片段吗，觉得挺有意思的
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3楼2015-07-17 18:00:15
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-17 22:53:45
原因非常多，在转录后水平、翻译水平、翻译后水平的因素都可呢过导致mRNA表达，蛋白质不表达。RT PCR扩增为cDNA，导入新的载体，试图重新表达。研究蛋白质的结构与功能。

我们可以继续讨论。
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4楼2015-07-17 22:33:41
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
说来话就长了，我写出几千字也未必讨论的完，不过今天实在没有时间。
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5楼2015-07-17 22:34:58
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 凌波丽 at 2015-07-17 22:34:58
说来话就长了，我写出几千字也未必讨论的完，不过今天实在没有时间。

好的，我再重新构建载体试一下，另外，想构建GFP融合蛋白，直接观察荧光蛋白表达，是不是更灵敏一些?有时间的话还请多多指导啊，多谢啦
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6楼2015-07-18 15:14:45
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chs4502

金虫 (小有名气)
会不会该mRNA只起到了转录水平上的调节作用呢？
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7楼2015-10-13 14:26:01
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yida1520034

新虫 (初入文坛)
请问你后来蛋白水平检测出来了吗？我现在也遇到这样的问题，想看看你后来怎么解决的？谢谢

发自小木虫IOS客户端
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8楼2017-11-08 23:48:53
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匿名

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9楼2019-09-22 13:18:10
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