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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 过表达目的蛋白，mRNA芯片检测发现HSP家族上调，是真实的吗？
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wonwin29

金虫 (小有名气)

[求助] 过表达目的蛋白，mRNA芯片检测发现HSP家族上调，是真实的吗？ 已有2人参与

在293细胞里过表达目的蛋白，mRNA芯片检测发现HSP家族显著上调（20倍以上），
因为HSP家族是和压力应激密切相关的，怀疑结果的可靠性，真实的吗？
或者只是外源表达蛋白引起的细胞应激反应？
但过表达其他蛋白，引起HSP家族上调没有如此显著。
更不解的是， Westernblot 验证，HSP蛋白水平并没有变化
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1楼 2014-07-02 11:05:23
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wonwin29

金虫 (小有名气)
HSP mRNA 上调数十倍， 蛋白没变化！ 我真是晕了！
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2楼2014-07-02 11:06:05
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乐乐王

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by wonwin29 at 2014-07-02 11:06:05
HSP mRNA 上调数十倍， 蛋白没变化！ 我真是晕了！

是不是转录后水平的调控造成的
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3楼2014-07-05 00:17:30
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bio-li

金虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
芯片结果是存在假阳性的，所以需要验证，以PCR验证结果为主吧
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你不能解决问题，你就会成为问题
4楼2014-07-07 09:32:16
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wonwin29

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bio-li at 2014-07-07 09:32:16
芯片结果是存在假阳性的，所以需要验证，以PCR验证结果为主吧

芯片上调数十倍的都是假阳性的话，那还能相信什么啊？ PCR没有验证，因为蛋白都没变化，就算验证出来也没法解释。
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5楼2014-07-07 15:15:01
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wonwin29

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 乐乐王 at 2014-07-05 00:17:30
是不是转录后水平的调控造成的...

你是说，转录后调控以维持蛋白水平不变？除非是他的降解增加了？
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6楼2014-07-07 15:16:28
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乐乐王

铁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-07 19:06:26
引用回帖:
6楼: Originally posted by wonwin29 at 2014-07-07 15:16:28
你是说，转录后调控以维持蛋白水平不变？除非是他的降解增加了？...

芯片是转录水平的数据，相当一部分的基因转录和翻译水平不一定一致，转录后水平的调控手段很多，现在我们不确定该基因是不是真的表达了，也就谈不上降解增加之说，你觉得呢
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7楼2014-07-07 17:54:07
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wonwin29

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 乐乐王 at 2014-07-07 17:54:07
芯片是转录水平的数据，相当一部分的基因转录和翻译水平不一定一致，转录后水平的调控手段很多，现在我们不确定该基因是不是真的表达了，也就谈不上降解增加之说，你觉得呢...

就是芯片上 mRNA增加，根本没有任何意义啊？可能在翻译前已经被调控、修饰、降解掉了？
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8楼2014-07-08 17:05:22
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