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aoaoshch木虫 (小有名气)
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酵母表达目的蛋白的mRNA半衰期 已有2人参与
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各位大侠，有没有人知道酵母表达目的蛋白的mRNA半衰期与目的蛋白的DNA序列有关系吗？ 比如，在相同载体的相同位置，分别插入序列不同的2个蛋白的DNA，进行酵母表达。产生的2个mRNA，应该只有插入序列不同、其它5’3’都一样吧。这2个mRNA的半衰期是否相同呢？查了下文献，说mRNA半衰期主要和3’端相关，是否可以认为这2个mRNA半衰期基本相同？  欢迎交流哈 |
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RNA的半衰期，跟你在体外提RNA时讨论的RNA稳定性没有关系。 并不是说RNA在传说中是一个"极易降解"的物质，在细胞里面就要蛋白保护着，不然就降解了。 其实RNA没有什么好不稳定的。 所谓RNA稳定性调控，指的更多的是细胞出于调控性的目的，主动的把RNA降解的过程。 是一个主动过程！ 不然的话，细胞类的RNA可以稳定很长时间，比如rRNA，一些高丰都的内参基因RNA，在抑制转录之后很长一段时间都不会发现水平有所降低。 那么你这个情况是体外转入的一段序列。 原则上说，如果你是转入的一段CDS，用的又是病毒元件的强启动子和强polyA信号，这种mRNA是非常稳定的，而且因为没有剪接等过程（当然酵母里面剪接本来就很少），这类mRNA逃过了很多内源mRNA的控制系统。 mRNA的稳定性主要讨论的确实是3‘UTR，mRNA的这个区域有很多影响其稳定性的顺式元件，最著名的如Alu元件。 还是那句话，你只转CDS，这些东西大多都不存在。 |
5楼2014-03-26 20:30:43
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