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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 甘露聚糖酶温度稳定性测定发生了神奇的现象
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青大好汉

银虫 (小有名气)

[求助] 甘露聚糖酶温度稳定性测定发生了神奇的现象 已有1人参与

经芽孢杆菌表达纯化后的甘露聚糖酶测定温度稳定性时发现，在最适温度及其以下时（不包括4度）处理15分钟酶活降低了很多，但是在最适温度以上处理酶活确增高了！这是怎么回事！

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加油！
1楼 2015-07-12 20:33:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先，保证你的酶所处的环境是国际主流做法的水，没有任何其它化合物；其次，将保温时间延长至国际主流做法的1小时；再次，每次做保温实验的酶液设置3个平行处理，应该是3管而不是1管；最后，只用一个水浴锅，或者每次使用同一根温度计测定水浴锅的温度。

这样做之后如果还出现你所说的情况，那我就信了。你所说的情况虽然极少出现，但也见有报道。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2015-07-12 22:19:28
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青大好汉

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2015-07-12 22:19:28
首先，保证你的酶所处的环境是国际主流做法的水，没有任何其它化合物；其次，将保温时间延长至国际主流做法的1小时；再次，每次做保温实验的酶液设置3个平行处理，应该是3管而不是1管；最后，只用一个水浴锅，或者每 ...

非常感谢您的帮助， 3个平行做到了，并且不止一次，也是在同一个水浴锅反应，反应了15分钟，用的是去离子水。经过后面几次实验发现，高温下酶活没怎么提高，并且随着时间的延续酶活逐渐降低，但是低温情况下，酶活依然很低，但是随着时间的延续有上升趋势，但是依然没有达到原始酶活

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加油！
3楼2015-07-13 09:22:36
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
3楼: Originally posted by 青大好汉 at 2015-07-13 09:22:36
非常感谢您的帮助， 3个平行做到了，并且不止一次，也是在同一个水浴锅反应，反应了15分钟，用的是去离子水。经过后面几次实验发现，高温下酶活没怎么提高，并且随着时间的延续酶活逐渐降低，但是低温情况下，酶活 ...

反应了15分钟
用的是去离子水
高温下酶活没怎么提高
低温情况下，酶活依然很低
随着时间的延续有上升趋势
依然没有达到原始酶活


请注意描述清楚，不理解你的回复中的逻辑。
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4楼2015-07-13 19:12:18
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