24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4168)
>导师招生 (440)
>硕博家园 (263)
>虫友互识 (253)
>文献求助 (157)
>考博 (122)
>招聘信息布告栏 (103)
>博后之家 (49)
>休闲灌水 (38)
>基金申请 (27)
>有机交流 (26)
>论文投稿 (26)
>考研 (23)
>公派出国 (22)
>教师之家 (17)
>找工作 (17)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 3.7
帖子: 36
在线: 12.8小时
虫号: 2672153
注册: 2013-09-22
性别: MM
专业: 病毒学

[求助] real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托已有5人参与

我用的是质粒模板，100ng-5ng的我都试过，几乎都是这样的图片，用的Taqman MGB探针，引物终浓度300nM,探针200nM,求指导是什么情况

308.jpg

real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-1

336.jpg

real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-2

351.jpg

回复此楼

» 猜你喜欢

ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析已经有0人回复
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有130人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点已经有0人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复

啊

1楼 2015-07-09 12:52:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

1322324659

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 615.9
散金: 7
帖子: 56
在线: 7.3小时
虫号: 3710576
注册: 2015-03-04
专业: 临床微生物学检验

引用回帖:

13楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2015-07-17 13:13:26
基线可以i手动调整但是一般不建议这么做你看看你的是线性图谱还是指数型图谱 2者是可以相互转换的我记得指数型图谱的基线就比较高线形图谱的基线是比较低的其实结果都是一样如果调整过后基线还是很高你 ...

使用Taqman MGB探针进行基因突变的荧光定量检测，报告基团FAM，淬灭基团BHQ。
以10的7次方IU/ml质粒为模板，按1%~100%的比例稀释，但是曲线一直不成线性中间10%~20%这个比例的CT值一直比32%的小。
前后用了两个体系，一个自己配的，一个用的Taqman master mix。Taqman master mix曲线很好看，有按比例来，但是产物一直不多。自己配的就是上面说问题，由于实验需要，我只能用自己配的体系。

求前辈指导！！