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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托
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哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

[求助] real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托 已有5人参与

我用的是质粒模板，100ng-5ng的我都试过，几乎都是这样的图片，用的Taqman  MGB探针，引物终浓度300nM,探针200nM,求指导是什么情况

real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托
308.jpg


real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-1
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real-time PCR跑出来的图像很奇怪，求大神指导，我是新人第一次做这个，拜托拜托-2
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啊
1楼 2015-07-09 12:52:07
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 哎呀那个雨 at 2015-07-13 15:48:46
我后来把退火温度降低了，P出来了，不过基线值很高，请问是什么原因呢...

基线可以i手动调整  但是一般不建议这么做 你看看你的是线性图谱还是指数型图谱 2者是可以相互转换的  我记得指数型图谱的基线就比较高  线形图谱的基线是比较低的 其实结果都是一样  如果调整过后基线还是很高  你看看CT值是多少  如果 CT过大 那么就是模板浓度低
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生命不息奋斗不止
13楼2015-07-17 13:13:26
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许彦

木虫 (正式写手)
根本就没有扩增

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-07-09 14:41:52
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wsad5213

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-13 23:14:14
你跑的PCR程序有问题把，如果有扩增条带应该出现峰的，可能你加样的时候哪个环节出了问题，你可以用内参基因对比着做一下
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4楼2015-07-09 16:11:57
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
绝对是没有扩增，我做荧光定量，阴性对照就是这种情况
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5楼2015-07-09 21:19:57
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查看全部 18 个回答
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