24小时热门版块排行榜    

查看: 602  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

whb21

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白纯化 已有1人参与

最近在做一个重组蛋白的纯化 pi9.2左右 采用tris ph10 上deae 蛋白挂柱不好 流穿较多 采用tris 7.0 上sp 结果同样 好苦恼 求大神指教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小小sao年 at 2015-07-07 09:26:50
你样品电导多少?稀释了吗?调ph了吗

sp柱 电导0.6 ph567都试过 全不挂柱子

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-07-08 11:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DEAE可以挂上部分目的蛋白,说明可以做些优化。看下过DEAE时最大的洗脱峰是什么东西,如果是杂蛋白就可以在过柱前先粗纯,如果是DNA或其他杂质就先把这些干扰去掉,再就是调整离子强度了,把电导调低些看看。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-07-04 10:42:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2015-07-04 10:42:03
DEAE可以挂上部分目的蛋白,说明可以做些优化。看下过DEAE时最大的洗脱峰是什么东西,如果是杂蛋白就可以在过柱前先粗纯,如果是DNA或其他杂质就先把这些干扰去掉,再就是调整离子强度了,把电导调低些看看。

我过DEAE时发现 低浓度NaCl可将目的蛋白洗下来,当然其中也有一些杂蛋白,高浓度NaCl时基本没有目的蛋白,我所使用的buffer是20mM Tris ph10 电导比较低了 但流穿中仍有大量目的蛋白,好苦恼.....目的蛋白挂柱效率低.....
3楼2015-07-04 21:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小sao年

金虫 (小有名气)

你样品电导多少?稀释了吗?调ph了吗

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-07-07 09:26:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见