24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

whb21

木虫 (著名写手)

应助: 105 (高中生)
金币: 9711.3
散金: 625
红花: 7
帖子: 2994
在线: 172.4小时
虫号: 928584
注册: 2009-12-15
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 蛋白纯化已有1人参与

最近在做一个重组蛋白的纯化 pi9.2左右采用tris ph10 上deae 蛋白挂柱不好流穿较多采用tris 7.0 上sp 结果同样好苦恼求大神指教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

回复此楼

» 猜你喜欢

三无产品还有机会吗已经有6人回复
垃圾破二本职称评审标准已经有7人回复
投稿返修后收到这样的回复，还有希望吗已经有7人回复
博士申请都是内定的吗？已经有14人回复
谈谈两天一夜的“延安行” 已经有13人回复
氨基封端PDMS和HDI反应快速固化已经有11人回复
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？已经有11人回复
论文投稿求助已经有4人回复
Applied Surface Science 这个期刊。有哪位虫友投过的能把word模板发给我参考一下嘛已经有3人回复

1楼2015-07-04 00:03:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

应助: 105 (高中生)
金币: 9711.3
散金: 625
红花: 7
帖子: 2994
在线: 172.4小时
虫号: 928584
注册: 2009-12-15
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

送红花一朵

引用回帖:

2楼: Originally posted by liuderong at 2015-07-04 10:42:03
DEAE可以挂上部分目的蛋白，说明可以做些优化。看下过DEAE时最大的洗脱峰是什么东西，如果是杂蛋白就可以在过柱前先粗纯，如果是DNA或其他杂质就先把这些干扰去掉，再就是调整离子强度了，把电导调低些看看。

我过DEAE时发现低浓度NaCl可将目的蛋白洗下来，当然其中也有一些杂蛋白，高浓度NaCl时基本没有目的蛋白，我所使用的buffer是20mM Tris ph10 电导比较低了但流穿中仍有大量目的蛋白，好苦恼.....目的蛋白挂柱效率低.....