应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白纯化
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 537  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

whb21

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白纯化 已有1人参与

最近在做一个重组蛋白的纯化 pi9.2左右 采用tris ph10 上deae 蛋白挂柱不好 流穿较多 采用tris 7.0 上sp 结果同样 好苦恼 求大神指教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-04 00:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DEAE可以挂上部分目的蛋白，说明可以做些优化。看下过DEAE时最大的洗脱峰是什么东西，如果是杂蛋白就可以在过柱前先粗纯，如果是DNA或其他杂质就先把这些干扰去掉，再就是调整离子强度了，把电导调低些看看。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

whb21
2楼2015-07-04 10:42:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2015-07-04 10:42:03
DEAE可以挂上部分目的蛋白，说明可以做些优化。看下过DEAE时最大的洗脱峰是什么东西，如果是杂蛋白就可以在过柱前先粗纯，如果是DNA或其他杂质就先把这些干扰去掉，再就是调整离子强度了，把电导调低些看看。

我过DEAE时发现 低浓度NaCl可将目的蛋白洗下来，当然其中也有一些杂蛋白，高浓度NaCl时基本没有目的蛋白，我所使用的buffer是20mM Tris ph10 电导比较低了 但流穿中仍有大量目的蛋白，好苦恼.....目的蛋白挂柱效率低.....
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-04 21:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小sao年

金虫 (小有名气)
你样品电导多少？稀释了吗？调ph了吗

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-07 09:26:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小小sao年 at 2015-07-07 09:26:50
你样品电导多少？稀释了吗？调ph了吗

sp柱 电导0.6 ph567都试过 全不挂柱子

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-07-08 11:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 whb21 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华理，数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +9 vv迷 2026-03-22 9/450 2026-03-27 15:59 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 292求调剂 +4 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-24 4/200 2026-03-24 16:41 by peike
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭