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pursuream

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 细菌侵染细胞后如何去除细胞外细菌?

最近做绿脓杆菌侵染细胞的实验,需要通过FACS对侵入细胞的细菌进行相对定量,而排出细菌粘附与细胞表面造成的干扰。不知有没有什么办法去掉细胞外的细菌?
其实在chamber里成像的时候也有类似的困扰,因为绿脓杆菌在玻璃上有很强的吸附,玻璃上的菌远多于细胞上的。
溶菌酶ok吗?如果能提供个类似的文献最好了!
多谢各位!
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zww-yic

新虫 (小有名气)

2楼2015-07-01 22:57:39
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zww-yic at 2015-07-01 22:57:39
我有文献

能不能也发我一份,同求相关文献,谢谢啦

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-07-02 19:57:15
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酸辣小锅米线

铁虫 (小有名气)

你好,我最近也在做细菌侵染细胞的实验,但是老是观察不到荧光,请问你用的是什么细胞
4楼2015-07-06 09:16:10
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pursuream

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 酸辣小锅米线 at 2015-07-06 09:16:10
你好,我最近也在做细菌侵染细胞的实验,但是老是观察不到荧光,请问你用的是什么细胞

我用绿脓肝菌和RAW Cell。不知你指的是什么荧光,细菌的话可以用诱导表达GFP的菌,或者做过基因操作插入GFP的。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-07-06 17:05:06
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pursuream at 2015-07-06 17:05:06
我用绿脓肝菌和RAW Cell。不知你指的是什么荧光,细菌的话可以用诱导表达GFP的菌,或者做过基因操作插入GFP的。
...

求细胞外除菌的文献,363995982@qq.com
6楼2015-07-07 09:33:50
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酸辣小锅米线

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pursuream at 2015-07-06 17:05:06
我用绿脓肝菌和RAW Cell。不知你指的是什么荧光,细菌的话可以用诱导表达GFP的菌,或者做过基因操作插入GFP的。
...

你好,我想问一下侵染1h后,每个细胞中细菌的数目大概是多少,用荧光标记细菌,在荧光显微镜下能看到吗
7楼2015-10-22 12:04:48
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pursuream

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 酸辣小锅米线 at 2015-10-22 12:04:48
你好,我想问一下侵染1h后,每个细胞中细菌的数目大概是多少,用荧光标记细菌,在荧光显微镜下能看到吗...

这个具体跟细胞系的细胞状态有关,RAW呑PAO1的话,一个细胞多的时候有十来个。当然也和加多少菌还关。
正常的话如果侵染前能看到荧光,侵染后也能。得用油镜,64x或100x吧。

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8楼2015-10-23 00:50:13
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pursuream

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 酸辣小锅米线 at 2015-10-22 12:04:48
你好,我想问一下侵染1h后,每个细胞中细菌的数目大概是多少,用荧光标记细菌,在荧光显微镜下能看到吗...

明场也能看出来一点。不是共聚焦的话,恐怕难拍出发表的图,图层太厚。即使共聚焦,也得搞清,是粘在表面还是呑进去了,不用庆大霉素处理的话,可能后者居多。

发自小木虫Android客户端
9楼2015-10-23 00:56:55
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Ligongqian

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zww-yic at 2015-07-01 22:57:39
我有文献

您好,能不能发一下除去细菌的文献? 1593543007@qq.com
10楼2019-07-03 10:17:24
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