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bindeng

金虫 (小有名气)

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[求助] 筛选慢病毒转染4T1细胞已有1人参与

各位大神，我正在做慢病毒转染4T1细胞，希望基因导入了细胞中，但是在用puro筛选的时候，细胞全部死了，对照没有死，所以用的puro浓度是应该是对的。求各位大神指点迷津，跪谢。

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1楼 2015-06-20 15:36:58

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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
bindeng: 金币+5 2015-06-24 17:16:40

一个解释就是如果你这个基因过表达了就可以在鼠源细胞里面调控一个可能致死的基因表达改变（比如在我的情况里，假设鼠细胞中一个可以促凋亡的基因刚好能被我转染的基因调控，而人细胞中由于启动子由于没有结合序列不能被调控）。那就有可能出现这种情况，即表达基因的死了，空载体的没死。如果真的是这种情况就不好办了，可能的受调控又能致死的基因可能性太多。有条件的话做裸鼠种人源细胞是一个可以绕过这种可能的方法。