| 查看: 3830 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求解pETDUET-1 原核共表达两个基因一些不懂的地方已有3人参与
|
||
|
有两个通过pulldown、酵母双杂验证过的两个互作蛋白，现在想在大肠杆菌中共表达这两个蛋白， 第一个问题：是在一个质粒中表达这两个蛋白好（pETDuet-1），还是分别在两个质粒中表达好(pETDuet-1/pACYCDuet-1)？ 第二个问题：假设在一个pETDuet-1共表达两个基因，而只有一个His标签（载体截图在下面），会不会因为结合力弱而只得到一个蛋白（与His直接相连的蛋白与Ni柱结合）另一个蛋白直接就是穿出，得不到互作蛋白啊？ PS: pulldown可以把这两个蛋白拉出来，那His纯化可以依靠结合力拉出来吗？  图片1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
博士读完未来一定会好吗
已经有25人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有9人回复
-
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗
已经有11人回复
-
读博
已经有4人回复
-
JMPT 期刊投稿流程
已经有4人回复
-
心脉受损
已经有5人回复
-
Springer期刊投稿求助
已经有4人回复
-
小论文投稿
已经有3人回复
-
申请2026年博士
已经有6人回复
Sedge
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 57.8
- 散金: 10
- 帖子: 50
- 在线: 21.7小时
- 虫号: 8490036
- 注册: 2018-04-10
- 专业: 微生物生理与生物化学
11楼2022-03-31 09:33:47
2楼2015-06-17 12:40:55
墨城
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1533.8
- 散金: 20
- 红花: 7
- 帖子: 444
- 在线: 41.4小时
- 虫号: 2335589
- 注册: 2013-03-10
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
3楼2015-08-11 20:15:53
4楼2015-08-11 22:23:14