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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA实验,蛋白核酸复合物样品滞留胶孔 已有2人参与

各位虫友:
       有没有虫友在EMSA实验中有丰富经验的,求指点:
       蛋白和核酸复合物样品滞留胶孔,自由的DNA能明显逐渐减少的趋势,有什么建议?
TBE buffer
   

调过pH,没有改进
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fificici

新虫 (初入文坛)

胶浓度太大?
2楼2015-06-17 10:25:12
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bingrener

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主EMSA用的是page胶吧?如果不出孔,可以用agarose胶试一下,一般都能出来。
3楼2015-06-17 10:35:12
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我的也是!!!!!加样跑胶的时候样都挂在胶孔那下不去,我用的12%的胶,初步认为胶浓度可能太大,下周再试一下

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
4楼2015-06-17 12:04:43
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fificici at 2015-06-17 10:25:12
胶浓度太大?

胶浓度试过3.5%的PAGE胶,还是不行
5楼2015-06-17 20:35:25
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bingrener at 2015-06-17 10:35:12
楼主EMSA用的是page胶吧?如果不出孔,可以用agarose胶试一下,一般都能出来。

agarose胶试过,效果还是一样,我猜应该是电泳buffer的pH值问题,看到其他虫友的情况,据说PAGE胶里加0.6%的甘油,可能有效果,我要试试
6楼2015-06-17 20:37:23
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

楼主,我最近也刚开始做EMSA。以前实验室没有人做过,所以有很多地方不懂,楼主有没有具体的实验方案或者实验方法啊,可否传给我一份,非常感谢
7楼2015-06-22 13:34:02
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fificici

新虫 (初入文坛)

请问楼主解决了吗  最近也出现相同问题
8楼2015-07-02 16:55:53
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1337221175

新虫 (初入文坛)

我最近做EMSA也出现了这样的问题,不知道楼主的问题有没有得到解决?
9楼2017-02-15 14:05:37
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