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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » EMSA实验，蛋白核酸复合物样品滞留胶孔
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA实验，蛋白核酸复合物样品滞留胶孔 已有2人参与

各位虫友：
       有没有虫友在EMSA实验中有丰富经验的，求指点：
       蛋白和核酸复合物样品滞留胶孔，自由的DNA能明显逐渐减少的趋势，有什么建议？
TBE buffer
   

调过pH，没有改进
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1楼 2015-06-14 21:40:23
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fificici

新虫 (初入文坛)
胶浓度太大？
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2楼2015-06-17 10:25:12
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bingrener

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主EMSA用的是page胶吧？如果不出孔，可以用agarose胶试一下，一般都能出来。
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3楼2015-06-17 10:35:12
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的也是！！！！！加样跑胶的时候样都挂在胶孔那下不去，我用的12％的胶，初步认为胶浓度可能太大，下周再试一下

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
4楼2015-06-17 12:04:43
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fificici at 2015-06-17 10:25:12
胶浓度太大？

胶浓度试过3.5%的PAGE胶，还是不行
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5楼2015-06-17 20:35:25
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bingrener at 2015-06-17 10:35:12
楼主EMSA用的是page胶吧？如果不出孔，可以用agarose胶试一下，一般都能出来。

agarose胶试过，效果还是一样，我猜应该是电泳buffer的pH值问题，看到其他虫友的情况，据说PAGE胶里加0.6%的甘油，可能有效果，我要试试
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6楼2015-06-17 20:37:23
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20083630zhan

木虫 (正式写手)
楼主，我最近也刚开始做EMSA。以前实验室没有人做过，所以有很多地方不懂，楼主有没有具体的实验方案或者实验方法啊，可否传给我一份，非常感谢
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7楼2015-06-22 13:34:02
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fificici

新虫 (初入文坛)
请问楼主解决了吗  最近也出现相同问题
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8楼2015-07-02 16:55:53
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1337221175

新虫 (初入文坛)
我最近做EMSA也出现了这样的问题，不知道楼主的问题有没有得到解决？
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9楼2017-02-15 14:05:37
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