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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA实验,蛋白核酸复合物样品滞留胶孔 已有2人参与

各位虫友:
       有没有虫友在EMSA实验中有丰富经验的,求指点:
       蛋白和核酸复合物样品滞留胶孔,自由的DNA能明显逐渐减少的趋势,有什么建议?
TBE buffer
   

调过pH,没有改进
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我的也是!!!!!加样跑胶的时候样都挂在胶孔那下不去,我用的12%的胶,初步认为胶浓度可能太大,下周再试一下

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
4楼2015-06-17 12:04:43
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bingrener

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主EMSA用的是page胶吧?如果不出孔,可以用agarose胶试一下,一般都能出来。
3楼2015-06-17 10:35:12
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fificici at 2015-06-17 10:25:12
胶浓度太大?

胶浓度试过3.5%的PAGE胶,还是不行
5楼2015-06-17 20:35:25
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hzaugyr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bingrener at 2015-06-17 10:35:12
楼主EMSA用的是page胶吧?如果不出孔,可以用agarose胶试一下,一般都能出来。

agarose胶试过,效果还是一样,我猜应该是电泳buffer的pH值问题,看到其他虫友的情况,据说PAGE胶里加0.6%的甘油,可能有效果,我要试试
6楼2015-06-17 20:37:23
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