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Rivermm

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌超声破壁的裂解液中溶菌酶要怎么加?已有3人参与

现在要配一个超声破壁的裂解液,根据实验指导要加溶菌酶,想问一下大家,加溶菌酶的话是可以直接加粉末,还是要配成溶液再加呢?
以及配裂解液的时候是不是最好先把其他的药品加好,溶菌酶的话现用现加,如果配的时候把溶菌酶一起加进去,那裂解液要怎么保存?
先谢谢啦?
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kaifu123

禁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Rivermm: 金币+2 2015-07-21 10:00:22
Rivermm: 金币+4 2015-07-21 10:00:58
本帖内容被屏蔽

2楼2015-06-11 14:39:57
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Rivermm: 金币+2 2015-07-21 10:00:27
我们破大肠杆菌根本不用溶菌酶,直接破就可以了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2015-06-11 16:05:58
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千山万水T

铜虫 (初入文坛)

直接用PBS破碎,和加溶菌酶效果一样

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-06-11 20:27:35
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小_菜鸟

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
Rivermm: 金币+2 2015-07-21 10:00:45
我们的做法是,先配制10g/L也就是10mg/mL的溶菌酶,等要用超声波破碎的时候,加入终浓度为0.1mg/mL溶菌酶,放到4℃里反应20Min,再进行超声,效果还不错。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2015-07-01 23:12:36
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Rivermm

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kaifu123 at 2015-06-11 14:39:57
0.2g溶菌酶溶解到10ml 10mmol/L Tris•Cl(pH8.0),分装成1ml/小份,保存于-20℃, 工作浓度1-2mg/ml就可以,在超声前作用十几分钟就可以了。大肠杆菌很容易超声破碎的,我直接用的PBS重悬菌体。破碎过程中保持低 ...

PBS的pH有要求吗,超声破壁之后的离心我找到的文献上边说要27000g,必须要这么高的转速吗,你离心用的多大转速,离多久啊,谢谢啦!
6楼2015-07-21 09:59:52
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Rivermm

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-06-11 16:05:58
我们破大肠杆菌根本不用溶菌酶,直接破就可以了

超声破壁之后的离心我找到的文献上边说要27000g,必须要这么高的转速吗,你离心用的多大转速,离多久啊,谢谢啦!
7楼2015-07-21 10:01:30
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Rivermm

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小_菜鸟 at 2015-07-01 23:12:36
我们的做法是,先配制10g/L也就是10mg/mL的溶菌酶,等要用超声波破碎的时候,加入终浓度为0.1mg/mL溶菌酶,放到4℃里反应20Min,再进行超声,效果还不错。

超声破壁之后的离心我找到的文献上边说要27000g,必须要这么高的转速吗,你离心用的多大转速,离多久啊,谢谢啦!
8楼2015-07-21 10:01:47
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东东魔神

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-06-11 16:05:58
我们破大肠杆菌根本不用溶菌酶,直接破就可以了

请问大肠杆菌的破壁条件是什么?
9楼2018-08-28 11:11:48
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