应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 核酸PAGE电泳每次制胶灌胶后等一会儿就会出现树枝状的气泡，求解！！！
汕头大学海洋科学接受调剂
241/3返回列表123下一页
查看: 3557  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)

[求助] 核酸PAGE电泳每次制胶灌胶后等一会儿就会出现树枝状的气泡，求解！！！ 已有6人参与

如题：核酸PAGE电泳每次制胶灌胶后等一会儿就会出现树枝状的气泡，求解！！！
          20%的胶，貌似一聚合体积就缩小了，所以出现了气泡？
          真心不知为何啊，实验卡在这里一周了，制不好胶！求诸位指导！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-08 21:56:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
刘姐不吃地瓜: 金币+6, ★★★很有帮助 2015-06-12 08:13:44
这个很正常，我也出现过这个现象，是因为在制胶刚开始的时候胶凝结的太快太猛了，我觉得有三种办法可以控制（最好一个一个改进，不要同时试），第一，改用小胶，平常用的都是midi胶标准胶，用面积小一些的试一试。第二，将TEMED和APS的量加少一些，可以让胶凝结的慢一些。第三，建议你在加APS合TEMED的时候将前边混合的聚丙烯酰胺等混合溶液在冰箱里边放一会儿，然后再加入催化剂混匀灌胶。还可以降低胶的浓度，自我感觉20%的胶和16%的胶的分离效果差别不大。
赞一下(2人) 回复此楼
激浪青春！
16楼2015-06-11 19:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
求帮忙！另外凝胶过程感觉到胶体发热，是不是这个原因，怎么处理呢！
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-09 08:25:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soholj

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
20%核酸胶浓度好高啊，没做过这么高的。你可以加热完了，先凉一下再倒，这样可能会好点
赞一下 回复此楼
3楼2015-06-09 16:36:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by soholj at 2015-06-09 16:36:20
20%核酸胶浓度好高啊，没做过这么高的。你可以加热完了，先凉一下再倒，这样可能会好点

额，PAGE电泳有加热这一步吗？就是混匀然后就灌胶啦！
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-09 17:22:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2015-06-09 19:23:01
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

吹不成调

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是的，浓度太高，我用的8%。
赞一下 回复此楼
萌妹智
6楼2015-06-09 20:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的经验你可以参考一下，能较完美解决你的困惑。
五年前我也遇到过这问题。
首先AP这类的助凝剂稍微少加一点点。
然后准备一个干净的塑料的薄薄的长长的宽度窄窄的长条（就像你制胶的梳子一样）用于在灌胶后插进去赶气泡用，去除胶中的气泡神器。
再者一小时内经常观察胶，要是胶底缩胶了就用一毫升移液器慢慢的往里吹点胶即补胶。
再者或半或一小时后即使把制好的胶用保鲜膜完全包裹起来当四度。
最后随时用随时取出，就能用。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-09 22:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
8楼2015-06-10 08:31:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 吹不成调 at 2015-06-09 20:33:20
是的，浓度太高，我用的8%。

主要我需要区分不同长度的核酸（相差15个碱基），而看说明貌似20%的浓度才能得到有效区分，所以木有办法啊！
赞一下 回复此楼
9楼2015-06-10 08:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2015-06-09 19:23:01
PAGE20%太高了  要是没什么特殊用途就12%或者8%都可以，电泳发热正常，电泳液用久了就这样，蛋白电泳不都是冷却嘛 没事的。

主要我需要区分不同长度的核酸（相差15个碱基），而看说明貌似20%的浓度才能得到有效区分，所以木有办法啊！
另外我是凝胶过程中胶体发热，不是电泳啦，嘿嘿~
赞一下 回复此楼
10楼2015-06-10 08:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 刘姐不吃地瓜 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +37 xaw. 2026-04-11 38/1900 2026-04-14 08:29 by 科宇老师
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 297求调剂 +22 ORCHID1 2026-04-10 25/1250 2026-04-13 23:11 by pies112
[考研] 335求调剂 +18 想上岸呀！！ 2026-04-12 19/950 2026-04-13 14:15 by 张zhihao
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 一志愿华中农微生物，288分，三年实验经历 +11 代fish 2026-04-09 11/550 2026-04-12 10:21 by Hayaay
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 一志愿京区985，085401电子信息，本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 一志愿沪9，326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 一志愿武理车辆 281 求调剂 +5 上岸研究生. 2026-04-07 5/250 2026-04-09 15:56 by only周
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭