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soholj

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
刘姐不吃地瓜: 金币+10, ★★★很有帮助, 恩恩,跑核酸有气泡的地方跑的会不平整。 那我试试少加点催化剂吧,谢谢! 2015-06-10 14:00:44
好吧。。。我看错了,以为是核酸电泳~你这个是垂直电泳吧,按我跑蛋白胶,这个气泡对蛋白电泳实验是没什么影响的。你这个跑核酸有影响?(核酸我没跑过这种),你这个可以少加点促进交联的溶剂,本身浓度就很高了,凝固会很快。要不就把胶在溶液里泡泡,或许能有用。
11楼2015-06-10 11:00:07
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匿名

用户注销 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
刘姐不吃地瓜: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-11 15:33:59
本帖仅楼主可见
12楼2015-06-10 21:39:52
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2015-06-10 21:39:52
不用,我是5个碱基  15的胶就好,产物大约80bp,270V  三个小时  没问题

试了一下15%的胶,中间好了一点,但是两边还是有很多。
另外270V不大吗,上次跑用120V,跑的很慢。
13楼2015-06-11 15:35:42
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Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
简直跟我遇到的情况一样,我觉得是胶凝固后体积略微缩小,导致胶与玻璃板之间进入少量空气所致。
根据我的经验,对电泳没有影响,可以不必理会。
14楼2015-06-11 16:24:29
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by Merrylegs at 2015-06-11 16:24:29
简直跟我遇到的情况一样,我觉得是胶凝固后体积略微缩小,导致胶与玻璃板之间进入少量空气所致。
根据我的经验,对电泳没有影响,可以不必理会。

我试着跑过了,虽然跑得开,但是条带不整齐呀~肿么办?
15楼2015-06-11 16:46:12
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
刘姐不吃地瓜: 金币+6, ★★★很有帮助 2015-06-12 08:13:44
这个很正常,我也出现过这个现象,是因为在制胶刚开始的时候胶凝结的太快太猛了,我觉得有三种办法可以控制(最好一个一个改进,不要同时试),第一,改用小胶,平常用的都是midi胶标准胶,用面积小一些的试一试。第二,将TEMED和APS的量加少一些,可以让胶凝结的慢一些。第三,建议你在加APS合TEMED的时候将前边混合的聚丙烯酰胺等混合溶液在冰箱里边放一会儿,然后再加入催化剂混匀灌胶。还可以降低胶的浓度,自我感觉20%的胶和16%的胶的分离效果差别不大。
激浪青春!
16楼2015-06-11 19:41:33
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by yz2007433052 at 2015-06-11 19:41:33
这个很正常,我也出现过这个现象,是因为在制胶刚开始的时候胶凝结的太快太猛了,我觉得有三种办法可以控制(最好一个一个改进,不要同时试),第一,改用小胶,平常用的都是midi胶标准胶,用面积小一些的试一试。第 ...

好的,谢谢,我试一下~
17楼2015-06-12 08:16:04
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wbb75

铜虫 (初入文坛)

十五碱基的话别用这种方法了,换其它方法吧
18楼2015-06-12 22:58:51
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by wbb75 at 2015-06-12 22:58:51
十五碱基的话别用这种方法了,换其它方法吧

那请问还有什么方法呀?
19楼2015-06-15 08:06:37
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knighthan112

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 刘姐不吃地瓜 at 2015-06-12 08:16:04
好的,谢谢,我试一下~...

楼主试过方法了没 我现在也出现这种问题,同求解决方案,十万火急!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
20楼2015-12-16 14:30:10
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