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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 核酸PAGE电泳每次制胶灌胶后等一会儿就会出现树枝状的气泡，求解！！！
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soholj

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
刘姐不吃地瓜: 金币+10, ★★★很有帮助, 恩恩，跑核酸有气泡的地方跑的会不平整。 那我试试少加点催化剂吧，谢谢！ 2015-06-10 14:00:44
好吧。。。我看错了，以为是核酸电泳~你这个是垂直电泳吧，按我跑蛋白胶，这个气泡对蛋白电泳实验是没什么影响的。你这个跑核酸有影响？（核酸我没跑过这种），你这个可以少加点促进交联的溶剂，本身浓度就很高了，凝固会很快。要不就把胶在溶液里泡泡，或许能有用。
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11楼2015-06-10 11:00:07
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
刘姐不吃地瓜: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-11 15:33:59
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12楼2015-06-10 21:39:52
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2015-06-10 21:39:52
不用，我是5个碱基  15的胶就好，产物大约80bp，270V  三个小时  没问题

试了一下15%的胶，中间好了一点，但是两边还是有很多。
另外270V不大吗，上次跑用120V，跑的很慢。
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13楼2015-06-11 15:35:42
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Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
简直跟我遇到的情况一样，我觉得是胶凝固后体积略微缩小，导致胶与玻璃板之间进入少量空气所致。
根据我的经验，对电泳没有影响，可以不必理会。
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14楼2015-06-11 16:24:29
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Merrylegs at 2015-06-11 16:24:29
简直跟我遇到的情况一样，我觉得是胶凝固后体积略微缩小，导致胶与玻璃板之间进入少量空气所致。
根据我的经验，对电泳没有影响，可以不必理会。

我试着跑过了，虽然跑得开，但是条带不整齐呀~肿么办？
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15楼2015-06-11 16:46:12
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
刘姐不吃地瓜: 金币+6, ★★★很有帮助 2015-06-12 08:13:44
这个很正常，我也出现过这个现象，是因为在制胶刚开始的时候胶凝结的太快太猛了，我觉得有三种办法可以控制（最好一个一个改进，不要同时试），第一，改用小胶，平常用的都是midi胶标准胶，用面积小一些的试一试。第二，将TEMED和APS的量加少一些，可以让胶凝结的慢一些。第三，建议你在加APS合TEMED的时候将前边混合的聚丙烯酰胺等混合溶液在冰箱里边放一会儿，然后再加入催化剂混匀灌胶。还可以降低胶的浓度，自我感觉20%的胶和16%的胶的分离效果差别不大。
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激浪青春！
16楼2015-06-11 19:41:33
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by yz2007433052 at 2015-06-11 19:41:33
这个很正常，我也出现过这个现象，是因为在制胶刚开始的时候胶凝结的太快太猛了，我觉得有三种办法可以控制（最好一个一个改进，不要同时试），第一，改用小胶，平常用的都是midi胶标准胶，用面积小一些的试一试。第 ...

好的，谢谢，我试一下~
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17楼2015-06-12 08:16:04
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wbb75

铜虫 (初入文坛)
十五碱基的话别用这种方法了，换其它方法吧
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18楼2015-06-12 22:58:51
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刘姐不吃地瓜

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by wbb75 at 2015-06-12 22:58:51
十五碱基的话别用这种方法了，换其它方法吧

那请问还有什么方法呀？
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19楼2015-06-15 08:06:37
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knighthan112

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 刘姐不吃地瓜 at 2015-06-12 08:16:04
好的，谢谢，我试一下~...

楼主试过方法了没 我现在也出现这种问题，同求解决方案，十万火急！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
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20楼2015-12-16 14:30:10
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